细胞简介:
大鼠精原分离自睾丸组织;睾丸呈微扁的卵圆形,表面光滑,覆盖着鞘膜脏层;深部是质地坚韧的白膜,在睾丸后缘增厚并进入睾丸,形成睾丸纵膈,纵膈发出许多睾丸小隔深入睾丸实质,将实质分为睾丸小叶,数量约为100~200。每个小叶内约有2~4条生精小管,具有产生精子的作用;生精小管之间的结缔组织中有睾丸间质细胞,具有产生雄激素的作用。生精小管首先汇合成为精直小管(也称直精小管),精直小管进入睾丸纵膈形成睾丸网,之后睾丸网发出12~15条输出小管通过睾丸后上缘进入附睾。生精小管的生精上皮是精子产生的地方,由生精细胞和支持细胞构成,成人的生精小管有30~70cm长。精子的产生过程包括生精细胞的分化、支持细胞的作用、雄激素的调节等。生精细胞并不是一种细胞,它是多种细胞的统称,包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞、精子。前者依次发育分化为后者,且依次从生精上皮的基部到管腔面排列,终形成精子进入到管腔之中,并借助生精上皮外侧的肌样细胞的收缩作用向下一级管腔移动。精原细胞是指由睾丸精子管上皮的原始生殖细胞经过多次有丝分裂而形成的细胞。原始的胚细胞经分化形成精原细胞,精原细胞经复制形成初级精母细胞,初级精母细胞经过减数第一次分裂后形成次级精母细胞,再经过减数第二次分裂形成精细胞。精细胞经过变形终形成精子。精原细胞属于雄性生殖细胞的早期发育阶段,能不断地进行有丝分裂,增加细胞数量,并分化为精母细胞。精原细胞贴近基膜,细胞呈圆形,核大而圆,梁色深。精原细胞在男性的一生中具有几乎无限分裂的能力,而且分裂过程中能够保持原有的基因性状不变。在增殖过程中,通过精原细胞的分裂和分化,由精原细胞产生精母细胞,进入成熟分裂,因而通过增殖可大大增加精母细胞的数量。按理论推算,一个精原细胞通过数次细胞分裂,可形成上百个初级精母细胞。但在生精过程早期,生精细胞很易发生变性,故实际上少于这个数字。在精原细胞的增殖过程中,有一部分Ad型精原细胞不再继续分裂,而是保留下来,成为新的精原干细胞,因此通过增殖不仅能使精原干细胞不断得到更新,且能使精原干细胞保持一定数量,从而使精子的产生持续地进行下去,不会枯竭。
方法简介:
实验室分离的大鼠精原采用混合酶多步消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠精原经AP(碱性磷酸酶)免疫组化染色鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 睾丸 | 产品货号 | YS-01X8238 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 圆形、椭圆形 |
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、GDNF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:圆形、椭圆形
传代特性:可传2-3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠精原体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品:
人脂肪酶(Lipase)ELISA 试剂盒
People of lipoxin A4 (LXA4) ELISA Kit 人脂氧素A4(LXA4)试剂盒
HumanNeuroglobin,NGBELISAKit 人脑红蛋白(NGB)试剂盒 96T/48T 进口分装
humanHypotheticalproteinLOC677168试剂盒人假定蛋白LOC677168试剂盒规格:96T/48T
组织肌酸激酶同工酶脑型(CK--BB)活性比色法定量试剂盒25次
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)试剂盒规格:96T/48T
小鼠新生甲状腺素(NN-T4)试剂盒 96T/48T
小鼠心肽(ANP)试剂盒 96T/48T
小鼠心肌转录因子GATA4试剂盒 96T/48T
小鼠心肌营养素1(CT-1)试剂盒 96T/48T
层粘连蛋白受体1抗体
小鼠(Cyt-C)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)试剂盒
HumanAcetylcholinesterase,AChEELISAKit 人乙酰酯酶(AChE)试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenImmunoglobulinG,IgG试剂盒鸡免疫球蛋白G(IgG)试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞CYP2B1蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次
MouseGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit小鼠生长激素释放多肽(GHRP)试剂盒规格:96T/48T
脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体
S100A4重组小鼠 S100A4 蛋白 (Fc 标签) Protein
肌原纤蛋白1(FBN1)重组蛋白 Recombinant Fibrillin 1 (FBN1)
STC2重组人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 Protein
CDH16 Protein Human 重组人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 蛋白
NTRK1 Protein Canine 重组狗 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签)
大鼠精原细胞肌原纤蛋白1(FBN1)重组蛋白 Recombinant Fibrillin 1 (FBN1)
CDH16 Protein Human 重组人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 蛋白
S100A4重组小鼠 S100A4 蛋白 (Fc 标签) Protein
NTRK1 Protein Canine 重组狗 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签)
STC2重组人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 Protein