土壤淀粉/酶试剂盒-微量法注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
淀粉/酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉/酶主要来自于微生物， 是一种重要的酶制剂，广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。
测定原理
淀粉/酶水解淀粉产生还原糖，可与 3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质，在 540nm 处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。
土壤淀粉/酶试剂盒-微量法需自备的仪器和用品
天平、水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板、甲苯。
试剂的组成和配制
试剂一：液体 12mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 8mL×1 瓶，4℃保存。若出现沉淀析出，需 70℃加热溶解后再用。试剂三：液体 14mL×1 瓶，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。
土壤淀粉/酶试剂盒-微量法测定加样表：
对照管 | 测定管 | |
土样（g） | 0.04 | 0.04 |
甲苯（μL） | 20 | 20 |
25℃静置 15min | ||
试剂一（μL） | 100 | 100 |
试剂二（μL） | 120 | |
蒸馏水（μL） | 120 | |
充分混匀，37℃反应 24h，8000rpm，25℃，离心 10min | ||
上清液（μL） | 120 | 120 |
试剂三（μL） | 120 | 120 |
充分混匀，90℃水浴 5min，待冷却后，取 200μL 于 96 孔板中测定 540nm 处吸光值， 分别记为A 对照管和A 测定管，△A=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。 | ||
土壤淀粉/酶试剂盒-微量法计算公式
标准曲线：y = 0.1263x - 0.034，R² = 0.9917；x 为标准品浓度，mg/mL，y 为吸光值ΔA。酶活单位定义：每 g 土样每天催化生成 1mg 还原糖为一个酶活力单位。
S-AL（mg/d/g 土样）=（△A +0.034）÷ 0.1263×V 反总÷W÷T
=47.51×（△A +0.034）
V 反总：反应体系总体积，0.24mL；T：反应时间，1d； W：样本质量，0.04g。
