土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)试剂盒-微量法正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物，能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫，在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用，是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
测定原理：
S-ASF 能够催化对-硝基苯硫酸钾生成对-硝基苯/酚，后者在 410nm 有特征光吸收。
自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)试剂盒-微量法试剂组成和配制：
试剂一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存（自备）；试剂二：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×2 支，-20℃保存；临用前加入 1.25mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂四：液体 5mL×1 瓶，4℃保存； 试剂五：液体 20mL×1 瓶，4℃保存； 样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)试剂盒-微量法测定步骤：
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样（g） | 0.05 | 0.05 |
试剂一（μL） | 12.5 | 12.5 |
振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置 15min
试剂二（μL） | 200 | 200 |
试剂三（μL） | 50 | |
蒸馏水（μL） | 50 |
混匀， 37℃水浴 1h 后
试剂四（μL） | 50 | 50 |
试剂五（μL） | 200 | 200 |
充分混匀，室温静置 2min 后，10000g 25℃离心 10min，取 200μL 上清液于 410nm 处测定吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)试剂盒-微量法活力计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0066x -0.013；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯/酚定义为一个酶活力单位。
S-ASF 活力（μmol/d /g 土样）＝ (ΔA+0.013) ÷0.0066×V 反总÷W÷T =19.09×(ΔA+0.013)
T：反应时间，1h=1/24d；V 反总：反应体系总体积：2.625×10-4 L；W：样本质量，0.05g。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0033x -0.013；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯/酚定义为一个酶活力单位。
S-ASF 活力（μmol/d /g 土样）＝ (ΔA+0.013) ÷0.0033×V 反总÷W÷T =38.19×(ΔA+0.013)
T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：2.625×10-4 L；W：样本质量，0.05g。
