土壤植酸酶试剂盒-可见分光光度法注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
植酸酶（phytase）是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸（盐）的一类酶的总称，属磷酸单酯水解酶，它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷，降低粪便中的磷含量，减轻对环境的污染，改善营养成分的吸收和利用，因此具有极其广泛的研究和应用价值。
测定原理
植酸酶在一定温度和 pH 值条件下，水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物，无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物，在 700nm 处有特征吸收峰，根据 700nm 处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
土壤植酸酶试剂盒-可见分光光度法自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅，甲苯（不允许快递）。
试剂的组成和配制
缓冲液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加缓冲液 30mL 配制，现用现配；用不完的试剂
4℃保存一个月。
试剂二：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。
显色剂：粉剂×6 瓶，4℃避光保存，临用前根据用量每瓶加 1mL 双蒸水溶解，再加 4mL 试剂二混匀。
样本处理
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
土壤植酸酶试剂盒-可见分光光度法测定操作表
对照管 | 测定管 | |
样本（g） | 0.06 | 0.06 |
甲苯 | 40 | 40 |
振荡混匀，室温放置 15min | ||
缓冲液（µL） | 1000 | |
试剂一（µL） | 1000 | |
混匀，37℃孵育 24h，10000g，4℃离心 5min，取上清 | ||
上清 | 500 | 500 |
显色剂（µL） | 500 | 500 |
混匀，静置 15min，测定 700nm 处吸光值，△A=A 测定管-A 对照管。 每个测定管设一个对照管。 | ||
酶活性计算公式
标准曲线：y = 1.759x + 0.0084，R2 = 0.9977；x 为标准品浓度（μmol/mL），y 为吸光值△A。
酶活性定义：在 37℃，pH5.5 的条件下，每克土样每小时从 5mmol/L 的植酸钠溶液中释放出 1μmol 的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性（μmol/d /g 土样）=（△A-0.0084）÷1.759×V 反总÷W÷T
=9.84×（△A-0.0084）
V 反总：反应总体积，1.04mL；T：反应时间，1d；W：样本质量，0.06g。
土壤植酸酶试剂盒-可见分光光度法注意事项
1、显色剂需要临用前根据用量配制，每一瓶是 5 个样本的用量，新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期，应放弃使用。
2、ΔA 线性范围为 0.01-1。
