土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒-可见分光光度法注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
LPS 又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS 广泛的存在于各种生物中。血清中 LPS 的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。
测定原理：
LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算 LPS 活性。
土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒-可见分光光度法自备仪器和用品：
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯 100mL、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 90mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 14mL×1 瓶，4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min。
试剂三：甲苯 100mL×1 瓶，4℃保存（自备）。试剂四：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。
标准品：液体 10μL×1 瓶，10 µmol/mL 的标准溶液，4℃保存。临用前加入 3.168 mL 甲苯，
充分溶解。
样本处理
建议称取约 0.1g 土样，加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆，再用回旋式振荡器振荡提取 15min，
4℃，4000g 离心 10min，取上清待测。
土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒-可见分光光度法测定操作：
1.分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 710 nm，蒸馏水调零。
2.试剂一和试剂二置于 37℃水浴预热 30min 以上。
3.在 5mL EP 管中依次加入下列试剂
试剂名称（μL） | 空白管 | 测定管 |
蒸馏水 | 375 | |
样本 | 125 | |
试剂一 | 750 | 750 |
试剂二 | 250 |
37℃振荡反应 10 min
试剂三 | 2000 | 2000 |
37℃振荡反应 10 min 后，8000g，25℃，离心 10min，取上清液
试剂名称（μL） | 空白管 | 测定管 | 标准管 |
上清液 | 1200 | 1200 | |
标准品 | 1200 | ||
试剂四 | 300 | 300 | 300 |
37℃振荡反应 5 min 后，静置 5min，取 800μL 上层液加入 1 mL 玻璃比色皿，于 710nm 处测定吸光值。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
土壤脂肪酶(S-LPS)试剂盒-可见分光光度法活性计算公式：
活性单位定义：37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1μmol 脂肪酸为一个酶活单位。
S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）÷T
=16×[(A 测定管－A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]÷W
C 标准品：10 µmol/mL；V 反总：反应总体积，2mL；V 样：反应中加入样本体积，0.125mL；
V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。
