土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)试剂盒-微量法注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。
测定原理：
S-β-XYS 催化对硝基苯fen-β-D-木糖苷产生对硝基苯fen，对硝基苯fen在 405nm 处有特征吸收峰，测定 405nm 光吸收增加速率，可计算 S-β-XYS 活性。
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)试剂盒-微量法自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 1mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。粗酶液提取：
约 0.1g 鲜土或风干土样，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆，室温振荡提取 30min，然后 10000g，
4℃，离心 10min，取上清待测。
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)试剂盒-微量法测定操作表：
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 405nm。
2、操作表
对照管 | 测定管 | |
样本（μL） | 40 | 40 |
试剂一（μL） | 10 | |
试剂二（μL） | 80 | 70 |
混匀，45℃水浴 20min | ||
试剂三（μL） | 80 | 80 |
混匀，静置 5min，405nm 处测定吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一 个对照管。 | ||
β-木糖苷酶活性计算公式：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y=13.226x+0.0011，R2=0.9998；x 为标准品浓度（μmol/mL），y 为吸光值ΔA。酶活定义：每克土样每天催化产生 1μmol 对硝基苯fen的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（μmol/d /g 土样）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V 样总：加入提取液体积，1mL； V 反总：反应总体积，0.12mL；V 样：反应中样品体积，
0.04mL； W：样品质量，g；T：反应时间，20min=1/72d； b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y=6.613x+0.0011，R2=0.9998；x 为标准品浓度（μmol/mL），y 为吸光值ΔA酶活定义：每克土样每天催化产生 1μmol 对硝基苯fen的酶量为一个酶活单位。
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)试剂盒-微量法β-木糖苷酶活性（μmol/d /g 土样）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)÷T
=32.66×(ΔA-0.0011)÷W
V 样总：加入提取液体积，1mL； V 反总：反应总体积，0.12mL；V 样：反应中样品体积，
0.04mL； W：样品质量，g；T：反应时间，20min=1/72d；
ΔA 控制在 0.01-1 范围内，若ΔA 大于 1，可适当减小样本量。标准曲线线性范围为：0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。
