土壤酸性蛋白酶试剂盒-微量法规格:100管/48样
产品内容:
试剂一:液体30mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入5mL 蒸馏水充分溶解待用;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入50uL 试剂七使粉剂润湿,然后加入10mL 试剂一, 转入烧杯中沸水浴磁力搅拌溶解后待用;
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入50mL 蒸馏水充分溶解待用;
试剂五:液体3mL×1 瓶,4℃保存;
试剂六:液体1.5mL×1 支,0.05mg/mL 标准酪氨suan溶液,4℃保存; 试剂七:液体1.5mL×1 支,4℃保存;
土壤酸性蛋白酶试剂盒-微量法产品说明:
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
酸性条件下,S-ACPT 可将酪蛋白水解产生酪氨suan;在碱性条件下,酪氨suan还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm 有特征吸收峰。
所需仪器及设备:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、双蒸水。
土壤酸性蛋白酶试剂盒-微量法操作步骤:
一、测定操作:
1、分光光度计预热30min 以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。
2、试剂二、三和四 40℃水浴 10min。
3、样本测定:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样(g) | 0.01 | 0.01 |
试剂一(μL) | 50 | 150 |
试剂三(μL) | 100 |
混匀,40℃水浴 30min,振荡 5-6 次,使土样与反应液充分接触
试剂二(μL) | 100 | 100 |
混匀,8000rpm 25℃离心 10min,取上清液,在EP 管或 96 孔板中加入下列试剂
测定管 | 对照管 | 标准管 | |
上清液(μL) | 30 | 30 | |
试剂六(μL) | 30 | ||
试剂四(μL) | 140 | 140 | 140 |
试剂五(μL) | 30 | 30 | 30 |
混匀,40℃水浴 20min,680nm 下读取各管吸光值 A
注意:标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
土壤酸性蛋白酶试剂盒-微量法S-ACPT 活性计算:
单位定义:每天每g 土样中产生1mg 酪氨suan为一个S-ACPT 活力单位。
S-ACPT(U/g)=C 标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=48×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管
C 标准管:标准管浓度,0.05mg/mL;V 反总:反应体系总体积,0.2mL;T:反应时间,30min=1/48d;
W:样本质量,0.01g。