土壤蔗糖酶(S-SC)试剂盒-可见分光光度法注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
规格:50T/24S
产品简介:
S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含
量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。
S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物, 在 540nm 有特征光吸收,在一定范围内 540nm 光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
土壤蔗糖酶(S-SC)试剂盒-可见分光光度法产品内容:
试剂一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前每瓶加入 40mL 蒸馏水充分溶解备用; 试剂四:液体 35mL×1 瓶,4℃保存;
标准品:粉剂×1 支,4℃保存,含 10mg 无shui葡萄糖(干燥失重<0.2%),临用前加入 1mL 蒸馏水溶解备用,4℃可保存 1 周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。
标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/mL。
土壤蔗糖酶(S-SC)试剂盒-可见分光光度法操作步骤:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 | - | |
试剂一(μL) | 15 | 15 | - | |
振荡混匀,使土样全部湿润,37℃放置 15min | ||||
试剂二(μL) | 250 | 250 | - | |
试剂三(μL) | 750 | - | ||
蒸馏水(μL) | 750 | - | ||
混匀,放入 37℃水浴培养 24 小时,10000g,4℃,离心 5min,取上清液,将培养结束的上清液稀释 10 倍(取 0.1mL 上清液,加入 0.9mL 蒸馏水)若后续测定吸光值仍大于 1.5 继续稀释。 | ||||
上清液(μL) | 200 | 200 | ||
标准液(μL) | 200 | |||
蒸馏水(μL) | 200 | |||
试剂四(μL) | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分混匀,放入沸水浴中煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀。
标准曲线的建立:540nm 处蒸馏水调零,读标准管吸光值,计算ΔA=A 标准管-A 空白管。以浓度(y)为纵坐标,吸光度 A(x)为横坐标建立标准曲线。
样品处理:540nm 处蒸馏水调零,读吸光值 A。计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
土壤蔗糖酶(S-SC)试剂盒-可见分光光度法S-SC 活力的计算:
根据标准曲线,将ΔA 带入公式中(x),计算样品浓度 y(mg/mL)。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-SC 活力单位。
S-SC 活力(U/g 土样)=y×10×V 反总÷W÷T=101.5×y
10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V 反总:反应体系总体积:1.015mL;W:样本质量,0.1g。













