土壤纤维素酶(S-CL)试剂盒-微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
产品内容：
试剂一：甲苯2.5mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：液体20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：液体6mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无shui葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1mL蒸馏水溶解，配制成10mg/mL葡萄糖溶液备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL。
土壤纤维素酶(S-CL)试剂盒-微量法产品说明：
S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。本产品采用3.5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
自备仪器用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
土壤纤维素酶(S-CL)试剂盒-微量法操作步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、 加样表（在EP管中依次加入下列试剂）
对照管 | 测定管 | 标准管 | 空白管 | |
风干土样（g） | 0.05 | 0.05 | - | |
试剂一(μL) | 25 | 25 | - | |
煮沸15min（盖紧） | 振荡混匀，室温放置15min | - | ||
试剂二（μL ） | 45 | 45 | - | |
试剂三（μL ） | 185 | 185 | - | |
蒸馏水（μL ） | 45 | 45 | - | |
振荡混匀，40℃水浴糖化1h 后，煮沸15min（盖紧，防止水分散失）得糖化液 | ||||
糖化液(μL) | 15 | 15 | - | |
标准液(μL) | - | - | 15 | |
蒸馏水(μL) | 15 | |||
试剂四(μL) | 35 | 35 | 35 | 35 |
混匀， 沸水浴中煮沸显色15min（盖紧，防止水分散失），冷却 | ||||
蒸馏水（μL） | 250 | 250 | 250 | 250 |
混匀，冷却后，取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中， 测定540nm下吸光值A，样品管计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设定一个对照管。 | ||||
标准曲线的建立：540nm处蒸馏水调零，读标准管吸光值ΔA=A标准管-A空白管。以浓度（y） 为纵坐标，吸光度ΔA（x）为横坐标建立标准曲线。
土壤纤维素酶(S-CL)试剂盒-微量法活力计算：
根据标准曲线，将样品ΔA 带入公式中（x）计算样品浓度 y（mg/mL）。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。S-CL 活力（U/g）＝y×V 反总÷W÷T =144×y
T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样本质量，0.05g。
注意事项：
若样品测定管吸光度过小（0.02），可延长反应时间，即 40℃水浴糖化时间，最后计算时加以换算即可。
