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超氧阴离子检测试剂盒

参考价480.00-950.00
具体成交价以合同协议为准
  • 公司名称合肥莱尔生物科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       号
  • 所  在  地合肥市
  • 厂商性质生产厂家
  • 更新时间2021/6/18 22:33:34
  • 访问次数713
规格
50T480.00元99 盒可售
100T950.00元99 盒可售
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关于莱尔:

合肥莱尔生物科技有限公司办公地址位于安徽省合肥市,国家重要的科研教育基地、现代制造业基地和综合交通枢纽,多年来秉承着“客户至上的企业精神标准化的质控检验,致力于化学试剂行业内的发展和创新,从而大大提高了产品质量,拥有着优质的产品供应链和专业的销售技术团队,发展迅速,为客户提供优质的产品、良好的技术支持、健全的售后服务。

主营ELISA试剂盒、细胞株、抗体、耗材、培养基、生物试剂、生化试剂盒研发与销售的高科技企业,涵盖技术研发、技术指导、技术转让、实验外包、课题代做等服务。公司拥有着经验丰富的技术人员,多年来通过不断与众多业内人士的交流、论证,致力于拓展生物化学领域,以高水准的产品为准则回馈广大用户,助跑众多新老客户的科研之路。

酶类化学试剂,生化试剂盒,化学试剂,抗体,ELISA试剂盒,比色法试剂盒,培养基,细胞,分子生物试剂,进口试剂
规格 50T/100T 仪器 分光光度计/酶标仪
运输 常温/2-8℃ 保质期 三个月
品牌 合肥莱尔生物科技有限公司 订购方式 联系客服
保存 详情见说明书 货期 现货
超氧阴离子检测试剂盒生物类样本均可检测。
分光光度法:主流测定体系为1mL,测试仪器分管光度计,能够最大限度地满足绝大多数用户的需要。
微量法:主流测定体系为0.2mL,测试仪器酶标仪或分管光度计,测定更加简便快捷。
超氧阴离子检测试剂盒 产品信息

超氧阴离子检测试剂盒微量法检测说明书

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。

测定原理:

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成 NO2NO2在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据A530值可以计算样品中O2含量,反应式为 NH2OH +2O2H→ NO2H2O2H2O。

自备实验用品及仪器:

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、氯仿和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 8mL×1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂四:氯仿,自备。

超氧阴离子检测试剂盒提取

1. 植物、动物组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后,10000g,4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后 10000g,4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。

3. 血清或培养液:直接测定。

测定操作表

1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至530nm。

2、操作表

 

空白管

测定管

样本(μL)

 

40

提取液(μL)

100

60

试剂一(μL)

80

80

混匀,37℃水浴 20min

试剂二(μL)

60

60

试剂三(μL)

60

60

混匀,37℃水浴 20min

试剂四(μL)

100

100

混匀,8000rpm,25℃,离心5min,小心吸取上层水相200μL于微量石英比色皿/96孔板中,

空白管调零,测定530nm处吸光值,记为A530 。

超氧阴离子含量计算公式

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

超氧阴离子检测试剂盒标准曲线:y=0.0115x-0.0038,R2=0.9986

1. 组织:

1)按照样本质量计算

超氧阴离子含量(μmol/g)= (A530 +0.0038)÷0.0115×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)×10-3×2= 1.74×(A530 +0.0038)÷W

超氧阴离子产生速率(μmol/ g·min)=1.74×(A530 +0.0038)÷W÷T

=0.087×(A530 +0.0038)÷W

2)按照蛋白质浓度计算

超氧阴离子含量(μmol/mg prot)= (A530 +0.0038)÷0.0115×V 反总÷(V 样×Cpr)×10-3×2=1.74×(A530 +0.0038)÷Cpr

超氧阴离子产生速率(μmol/ mg prot·min)=1.74×(A530 +0.0038)÷Cpr÷T

= 0.087×(A530 +0.0038)÷Cpr

2. 细菌,真菌:

超氧阴离子含量(µmol/104cell)= (A530 +0.0038)÷0.0115×V 反总÷(V 样÷V 样总×细胞数量)×10-3×2= 1.74×(A530 +0.0038)÷细胞数量

超氧阴离子产生速率(µmol/mg prot·min)= 1.74×(A530 +0.0038)÷细胞数量÷T

= 0.087×(A530 +0.0038)÷细胞数量

3. 血清或培养液

超氧阴离子含量(μmol/L)= (A530 +0.0038)÷0.0115 ×V反总÷V 样×2

= 1739.13×(A530 +0.0038)

超氧阴离子产生速率(μmol/L·min)= 1739.13×(A530 +0.0038) ÷T= 86.96×(A530 +0.0038)

V 样总:加入提取液体积,1 mL; V 反总:反应总体积,0.4mL;V 样:反应中样品体积,0.04mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;T:反应时间,20min;2: 2分子O2参与反应生成1分子 NO2

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.00575x-0.0038,R2=0.9986

1. 组织:

1)按照样本质量计算

超氧阴离子含量(μmol/g)= (A530+0.0038)÷0.00575×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3×2= 3.48×(A530+0.0038)÷W

超氧阴离子产生速率(μmol/g·min)=3.48×(A530 +0.0038)÷W÷T

=0.174×(A530+0.0038)÷W

2)按照蛋白质浓度计算

超氧阴离子含量(μmol/mg prot)= (A530 +0.0038)÷0.00575×V反总÷(V样×Cpr)×10-3×2= 3.48×(A530+0.0038)÷Cpr

超氧阴离子产生速率(μmol/mg prot·min)= 3.48×(A530+0.0038)÷Cpr÷T

=0.174×(A530+0.0038)÷Cpr

2. 细菌,真菌:

超氧阴离子含量(µmol/104cell)= (A530+0.0038)÷0.00575×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)×10-3×2= 3.48×(A530+0.0038)÷细胞数量

超氧阴离子产生速率(µmol/104cell·min)= 1.74×(A530+0.0038)÷细胞数量÷T

=0.174×(A530 +0.0038)÷细胞数量

3. 血清或培养液

超氧阴离子含量(μmol/L)= (A530+0.0038)÷0.00575 ×V 反总÷V 样×2

= 3478.26×(A530+0.0038)

超氧阴离子产生速率(μmol/L·min)= 3478.26×(A530+0.0038) ÷T

= 173.91×(A530 +0.0038)

超氧阴离子检测试剂盒V 样总:加入提取液体积,1 mL; V 反总:反应总体积,0.4mL;V 样:反应中样品体积,0.04mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;T:反应时间,20min;2:2分子O2参与反应生成1分子NO2

注意事项

1、 OD 值大于 1.5,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。

2、 样品制备好后,立刻进行测定,请勿将样品进行长时间的低温保存,以免影响测定结果。

3、 试剂四有一定的毒性,请操作时做好防护措施。

4检出限为 0.33µmol/L

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