土壤蔗糖酶（S-SC）检测试剂盒说明书，正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理：
S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在 510nm 有特征光吸收，在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与S-SC 活性成正比。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
土壤蔗糖酶（S-SC）检测试剂盒试剂组成和配制：
试剂一：甲苯 1mL×1 瓶，4℃保存；（自备）试剂二：液体 7.5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 22mL 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂 4℃保存；
试剂四：液体 22mL×1 瓶，4℃避光保存。
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
测定步骤和加样表：
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样（g） | 0.03 | 0.03 |
试剂一（μ L） | 5 | 5 |
振荡混匀，使土样全部湿润，37℃水浴 15min
试剂二（μ | L） | 75 | 75 |
试剂三（μ | L） | 220 |
|
蒸馏水（μ | L） |
| 220 |
充分混匀，放入 37℃水浴培养 24 小时，10000 g，4℃，离心 5min，取上清液
上清液（μ L） | 85 | 85 |
试剂四（μ L） | 215 | 215 |
土壤蔗糖酶（S-SC）检测试剂盒充分混匀，95℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却，蒸馏水稀释 10 倍（可以吸取 100μ L，加入 900μ L 蒸馏水稀释；若吸光度大于 4，可以加大稀释倍数），取 200uL 至微量石英比色皿或 96 孔板中 510nm 处读吸光值 A。计算 Δ A=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
S-SC 活性计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 4.9x -0.062；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。单位的定义：每天每g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-SC 活力单位。
S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( Δ A+0.062) ÷4.9×10×V 反总÷W÷T =20.4×(Δ A+0.062)
10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样本质量，0.03g。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
土壤蔗糖酶（S-SC）检测试剂盒标准条件下测定的回归方程为y = 2.45x -0.062；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。单位的定义：每天每g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-SC 活力单位。
S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( Δ A+0.062) ÷2.45×10×V 反总÷W÷T =40.8×(Δ A+0.062)
10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样品质量，0.03g。
