SALPT土壤碱性蛋白酶可见分光光度法

产品内容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

产品属性：

商品介绍：

测定意义

土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ALPT在碱性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

测定原理：

碱性条件下，S-ALPT可将酪蛋白水解产生酪氨；在碱性条件下，酪氨还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。

实验中所需仪器及设备：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、双蒸水

注意事项：

1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

下列是公司正在热销的产品：

phospho-JunB(Ser79)  磷化活化蛋白激B抗体    * 0.1ml

Jun D  活化蛋白激D抗体    * 0.1ml

phospho-JunD(Ser255)  磷化活化蛋白激D抗体    * 0.1ml

CK I alpha/STK  丝/苏蛋白质激抗体Casein kinase Ⅰα(CKⅠα)    * 0.1ml

CK II Alpha/STK  丝/苏蛋白质激抗体Casein kinase Ⅱα(CKⅡα)    * 0.1ml

CSNK1G2  酪蛋白激1γ2抗体    * 0.2ml

CK II alpha/STK  丝/苏蛋白质激II α抗体    * 0.2ml

CK II beta  丝/苏蛋白激II β抗体(casein kinase IIβ)    * 0.1ml

DBF4B/ASKL1  S期激活化蛋白DBF4B抗体    * 0.2ml

P-CK/Cytokeratin AE1 + AE3  广谱细胞角蛋白PCK抗体    * 0.1ml

CDKL3/NKIAMRE  细胞周期蛋白依赖性激样3抗体    * 0.2ml

CK18  细胞角蛋白18抗体（C端）    * 0.1ml

CK18  细胞角蛋白18抗体    * 0.1ml

phospho-CK18(Ser74)  磷化细胞角蛋白18抗体    * 0.1ml

phospho-CK18(Ser33)  磷化细胞角蛋白18抗体    * 0.1ml
SALPT土壤碱性蛋白酶可见分光光度法锌粒 99.99% metals basis亚铁化钠 CPAnti-GAP43  神经生长相关蛋白43

超纯锌粒 棒状,99.9999% metals basis原甲酯 98%Anti-phospho-GAP43(Ser41)  磷化神经生长相关蛋白43抗体

锌 99.999% metals basis原甲三乙酯 99%Anti-GAPDH  3-磷甘油脱氢（兔来源组化用抗体）

锌粒 SP氟化铵 AR，98%Anti-GAPDH  3-磷甘油脱氢（兔来源组化用抗体）

双环己酮草酰二腙 AR氟化铵 GR，98%Anti-GAPDH  3-磷甘油脱氢（兔来源组化用抗体）

二乙酰一肟 AR氟化氢铵 AR,98.5%       Anti-GAI3  抑制型G蛋白α3抗体

间甲基红 Indicator氢氟 AR,40.0%Anti-CXCR3/CD183  表面趋化因子受体3抗体

米氏酮 98%氟 AR,40.0%Anti-CXCR3/CD183  表面趋化因子受体3抗体