细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人张氏肝细胞；Chang liver价格准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
产品描述：
细胞名称 人张氏肝细胞；Chang liver价格
形态特性上皮细胞样
生长特性贴壁生长
特征特性张氏肝细胞1954年从非恶性的人体组织中建立。广泛应用于病毒学、生化和恶性肿瘤相关的转移研究。
培养条件RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清，10%
传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况PN5
冻存条件*培养基+8%DMSO
支原体检测阴性
STR
同工酶
染色体
注意事项：
1.一般客户拿到人张氏肝细胞；Chang liver价格后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
TF*小鼠组织因子规格48T/96T
t-PA*小鼠组织型纤溶酶原激活剂规格48T/96T
TPA*小鼠组织多肽抗原规格48T/96T
HD*小鼠组织蛋白去乙酰化酶规格48T/96T
cath-K*小鼠组织蛋白酶K规格48T/96T
histon-H2b*小鼠组蛋白H2b规格48T/96T
HIS*小鼠组胺规格48T/96T
TFR/CD71*小鼠转铁蛋白受体规格48T/96T
TGFβ2*小鼠转化生长因子β2规格48T/96T
TGF-β1*小鼠转化生长因子β1规格48T/96T
人张氏肝细胞；Chang liver价格抗原ATEXPA10peptide植物扩张蛋白ATEXPA10（拟南芥）抗原0.5mgATEXPA10peptide植物扩张蛋白ATEXPA10（拟南芥
活化复制因子1ATF1(ActivatingTranscriptionFactor1)活化复制因子10.5mgATF1(ActivatingTranscriptionFactor1
ATF2(ActivatingTranscriptionFactor2)活化复制因子2（多肽）0.5mgATF2(ActivatingTranscriptionFactor2
活化转录因子3抗原ATF3(ActivatingTranscriptionFactor3)活化转录因子3抗原0.5mgATF3(ActivatingTranscriptionFactor3
活化转录因子6抗原ATF6(activatingtranscriptionfactor6)活化转录因子6抗原0.5mgATF6(activatingtranscriptionfactor6
毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗原ATM(ataxiatelangiectasiamutated)毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗原0.5mgATM(ataxiatelangiectasiamutated
钠钾ATP酶通道蛋白抗原ATP1b2/Na+K+ATPase(ATPase,Na+/K+transporting,beta2polypeptide)钠钾ATP酶通道蛋白抗原0.5mgATP1b2/Na+K+ATPase(ATPase,Na+/K+transporting,beta2polypeptide
AU1tagpeptideAU1tag标签多肽AU1tagpeptideAU1tag标签多肽0.5mgAU1tagpeptideAU1tag标签多肽
冷冻保存细胞之方法：
人张氏肝细胞；Chang liver价格冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
