一、细胞基本属性
产品名称 | 产品规格 | 商品货号 |
大鼠背根神经节细胞 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | A01X1714 |
细胞名称：大鼠背根神经节细胞
组织来源：脊髓组织
种属来源：大鼠
细胞简介：背根神经节(DRG)是周围神经系统的感觉神经元:背根神经节分散存在于PNS，定位于和脊髓紧密相连的脊神经根上，DRG起源于神经峭，由多潜能前体细胞迁移分化形成。每个神经节主要由感觉神经元和神经纤维构成。神经元周围有卫星细胞，轴突由雪旺细胞包绕形成髓鞘。DRG是外周和中枢纤维联系的一个重要中继站，在神经系统中起着重要作用。DRG神经元直接参与一些遗传性和获得性神经的病理生理。DRGs的体外培养模型已广泛用于轴突的导向及再生、突触发育和可塑性、中枢神经系统和周围神经系统的髓鞘形成，神经营养因子作用及受体分布、神经细胞衰老机制、基因治疗、组织工程等神经科学的研究，成为遗传性、获得性神经的一个新的研究途径。大鼠背根神经节细胞分离自脊髓组织:背根神经节是周围神经系统的感觉神经元:背根神经节分散存在于PNS，定位于和脊髓紧密相连的脊神经根上，DRG起源于神经峭，由多潜能前体细胞迁移分化形成。每个神经节主要由感觉神经元和神经纤维构成.神经元周围有卫星细胞，轴突由雪旺细胞包绕形成髓鞘.DRG是外周和中枢纤维联系的一个重要中继站，在神经系统中起着重要作用.DRG神经元直接参与一些遗传性和获得性神经的病理生理.DRGS的体外培养模型已广泛用于轴突的导向及再生、突触发育和可塑性、中枢神经系统和周围神经系统的髓鞘形成，神经营养因子作用及受体分布、神经细胞衰老机制、基因治疗、组织工程等神经科学的研究，成为遗传性、获得性神经的一个新的研究途径.
培养基：大鼠背根神经节细胞培养基：
换液频率:每2-3天换液一次
包被条件：多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml）
生长特性：贴壁
细胞形态：多角状细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%胰dan白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
二、使用方法：
大鼠背根神经节细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈多角状细胞样，在技术部标准操作流程下，细胞可传可传1-2代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在出售的产品：
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大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞；RBL-1 | 大鼠睫状神经营养因子(CNTF)试剂盒 ELISA |
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小鼠肝癌瘤株；H22 | 小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)试剂盒elisa |
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人侵袭性脉络膜黑色瘤细胞；C918 | 热休克转录因子2(HSF2)ELISA试剂盒 |
细胞培养注意事项：
公司产品仅用于科研关于原代细胞培养的注意事项。原代细胞培养是一项非常重要的实验技术，掌握好这些注意事项，能让你的实验更顺利。
首先，无菌操作是关键。一定要保持操作环境的清洁，避免细菌或霉菌污染，否则实验就会失败。
其次，选择适合的培养基和血清也很重要。不同细胞对培养基和血清的需求不同，所以要根据细胞类型来选择合适的培养基和血清。
另外，也是细胞培养中的成分。要新鲜配制，在贮存过程中也要定期补充。
在细胞培养过程中，静置培养也是非常重要的。细胞在消化分离后需要一定的时间来适应新环境，所以在这段时间内要避免频繁取出培养瓶观察。
此外，消化时间也要控制得当。通常消化至肉眼可见微小组织颗粒即可，过长的消化时间会导致细胞损伤加重，影响细胞培养成活率。
最后，对于一些特殊类型的细胞，可能需要添加一些特殊的生长因子来促进细胞生长和增殖。但需要注意的是，这些生长因子的费用通常较高。
