小鼠胰岛细胞实验方法

1.产品名称：小鼠胰岛细胞实验方法

2.组织来源：胰腺组织

3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠胰岛细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有*、*原、脂肪酶、*等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌*，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%，每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规治疗产生的严重低血糖症状，具有创伤小及并发症少等优点，是zui有前景的Ⅰ型糖尿病治疗方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤，分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。

本公司的小鼠胰岛细胞采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经DTZ染色鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5.培养基信息：

RPMI-1640、FBS、Penicillin、Streptomycin等

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
Homo sapiens (Human)
脂联素(ADP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Adiponectin (ADP) 96T Y17080 Mus musculus (Mouse)
晚期糖基化终末产物受体(AGER)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER) 96T Y17081 Mus musculus (Mouse)
葡萄糖激酶(GCK)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Glucokinase (GCK) 96T Y17082 Homo sapiens (Human)
降钙素原(PCT)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Procalcitonin (PCT) 96T Y17083 Homo sapiens (Human)
髓样前体细胞抑制因子2(MPIF2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2) 96T Y17084 Homo sapiens (Human)
髓样前体细胞抑制因子2(MPIF2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2) 96T Y17085 Mus musculus (Mouse)
*10(KLK10)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Kallikrein 10 (KLK10) 96T Y17086 Homo sapiens (Human)
*10(KLK10)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Kallikrein 10 (KLK10) 96T Y17087 Mus musculus (Mouse)
*10(KLK10)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Kallikrein 10 (KLK10) 96T Y17088 Rattus norvegicus (Rat)
载脂蛋白E(APOE)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Apolipoprotein E (APOE) 96T Y17089 Homo sapiens (Human)
吲哚乙酸(IAA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Indole 3 Acetic Acid (IAA) 96T Y17090 General
补体C3转化酶(C3c)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Complement C3 Convertase (C3c) 96T Y17091 Homo sapiens (Human)
Anti-IKI3 family protein/FITC  荧光素标记拟南芥IKI3抗体IgG   0.2ml
Anti-IKK gamma/FITC  荧光素标记核因子κB激酶gamma抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-IKK alpha/FITC  荧光素标记核因子κB激酶alpha抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-IKK beta /FITC  荧光素标记核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶gamma抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-phospho-IKK gamma (Ser31) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶gamma抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-phospho-IKK alpha (Thr23) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶alpha抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-phospho-IKK gamma (Ser376)/FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶gamma抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶alpha抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶alpha抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶alpha/beta抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶alpha/beta抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-phospho-IKK beta (Tyr466) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG   0.2ml
Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC  荧光素标记磷酸化核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgG   0.2ml