P5CS吡咯啉5羧酸合成酶检测试剂盒微量法 返回列表页

产品属性：

商品介绍：

测定意义

脯氨是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯氨代谢因其初始底物不同，分为谷氨( Glu) 和鸟氨( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS， Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase）是以谷氨为前体合成脯氨途径的关键酶，对植物适应逆境胁迫起关键作用。

测定原理：

吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷，通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。

需自备的仪器和用品：

可见外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：

公司产品仅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

下列是公司正在热销的产品：

GTPBP4/CRFG  GTP结合蛋白4抗体（慢性肾功能衰竭蛋白）    * 0.2ml

HACE1  E3泛蛋白连接HACE1抗体    * 0.2ml

SMARCA6/HELLS  特异性解旋抗体    * 0.2ml

SMARCA1/SNF2L  解旋SNF2L抗体    * 0.2ml

ACBD6  酰基A结合结构域蛋白6抗体    * 0.2ml

ACVR1B/ALK4  激活A受体1B抗体    * 0.2ml

ACY1/Aminoacylase 1  基酰化1抗体    * 0.2ml

ACVRL1/ALK1  激活受体样激1抗体    * 0.2ml

ASAH2  酰基鞘醇脱酰2抗体    * 0.2ml

ASAM/ACAM  脂肪细胞特异性粘附分子抗体    * 0.1ml

CARPX/CA10  相关蛋白抗体（脑蛋白15）    * 0.1ml

CA12  12抗体    * 0.1ml

IGFR3/CD16  FC段γ受体3/球蛋白G Fc段受体III抗体    * 0.1ml

CD200/MOX1  膜糖蛋白CD200抗体    * 0.1ml

CD66c/CEACAM6  癌胚抗原相关细胞粘附分子抗体    * 0.2ml
P5CS吡咯啉5羧酸合成酶检测试剂盒微量法荧光APC标记猪胰岛蛋白Anti-IL32 Antibody小鼠转铁蛋白受体（TFR/CD71）elisa定量检测试剂盒

荧光APC标记血蓝蛋白Anti-IL26 Antibody小鼠高密度脂蛋白 （HDL） elisa定量检测试剂盒

荧光APC标记人血白Anti-IL31RA Antibody小鼠基质衍生因子2样蛋白1（SDF2L1）elisa定量检测试剂盒

荧光APC标记胰糜蛋白Anti-IL36A Antibody小鼠诱导转化生长因子β（TGFbI）elisa定量检测试剂盒

荧光Cy3标记链霉亲和Anti-IL27 Antibody小鼠血管内皮生长因子C（VEGF-C）elisa定量检测试剂盒

荧光Cy3标记亲合Anti-IL36B Antibody小鼠血清淀粉样蛋白A2（SAA2）elisa定量检测试剂盒

Cy3标记蛋白AAnti-IL36RN Antibody小鼠血管内皮生长因子D（VEGF-D）elisa定量检测试剂盒

荧光Cy3标记兔IgG(流式同型对照)Anti-IL5RA Antibody小鼠α半乳糖基抗原（α-Gal）elisa定量检测试剂盒

注意事项：

1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。