人c-myc癌基因产物（c-myc）ELISA试剂盒检测说明

人c-myc癌基因产物(c-myc)ELISA试剂盒检测说明由上海远慕生物提供，本司提供ELISA试剂盒免费代测服务，所供应的产品非常多，ELISA试剂盒种属成千上万，有：大鼠，小鼠，人，植物，马，兔，鸡，鸭，猪，犬，植物，豚鼠及其他，欢迎订购!

人c-myc癌基因产物(c-myc)ELISA试剂盒检测说明

【信息说明】

中文名：人c-myc癌基因产物(c-myc)ELISA试剂盒

中文别名：人c-myc癌基因产物(c-myc)ELISA kit

供应商：上海远慕

规格：48t/96t

保存：2~8℃

有效期：6个月

样本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

【技术原理】

1、抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

2、结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

3、酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。

4、受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。

5、此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

6、加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

7、测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

【操作步骤】

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。

6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。

7、温育：重复4的操作。

8、洗板：重复5的操作。

9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。

10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。

11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。

12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【注意事项】

1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3、消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6、在储存和温育时避免强光直接照射。

7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9、不能使用过期产品。

10、如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

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