人抗天然脱氧核糖核酸抗体（n-DNA-Ab）ELISA试剂盒检测

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人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA试剂盒检测

【信息说明】

中文名：人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA试剂盒

中文别名：人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA Kit

供应商：上海远慕

规格：48t/96t

保存：2~8℃

有效期：6个月

样本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

【操作方法】

双抗体夹心法

1、包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

2、加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。

7、也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

【注意事项】

1、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

2、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 

4、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。  

5、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

8、按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

9、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

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