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人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒样本处理

时间:2018/5/15阅读:903
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上海远慕生物详细讲述人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒样本处理,操作步骤,信息说明及其他咨讯 ,本司所供应的品种有很多,包含ELISA试剂盒,生化试剂,动物血清,培养基,抗体,标准品,对照品,抗原,实验耗材,染色液,溶液,缓冲液,化学试剂及其他试剂等,欢迎订购!

人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒样本处理

人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒样本处理

 

【信息说明】

中文名:人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒

中文别名:人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA Kit

供应商:上海远慕

规格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6个月

检测方法:双抗夹心法

产地:国产/进口

检测样本:血清、血浆细胞上清液、灌洗液。

产品用途:仅用于科研实验,严禁用于临床诊断

试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。

ELISA试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。

 

【样本处理】

1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用,胃液、唾液的采集时间是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
2、采集血清时,一般要加入总体积1%的抗凝剂,采集后先室温或4℃静置半小时后,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
3、组织提取液、肺泡灌洗液等,采集后离心分离,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存备用;
4、采集血浆时一般不加抗凝剂,采集后立即离心800-1000rmpx5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
5、不贴壁细胞(分泌性蛋白),将培养基和细胞转移至10ml离心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml离心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理。

 

【性能特点】

1、专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。

2、灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。

3、样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。

4、结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。

5、可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。

6、可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。

7、仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置。

 

【操作步骤】

1、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2、弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。

3、弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

4、每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。

5、弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。

6、每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。

7、每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

8、立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。

9、实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

 

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