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棉花组织RNA的提取是进行棉花分子生物学研究的必要前提。进行Northern杂交分析、体外翻译、建立cDNA文库、RT2PCR及差异显示分析等研究都需要高质量的RNA(李宏和王新力,1999;赵双宜等...
收集细胞,离心5000r/min,5分钟,弃上清,加入异硫氰酸胍变性液(异硫氰酸胍4mol/L;柠檬酸钠25mmol/L,Sarkosy10.5%,β-巯基乙醇0.1mol/L)500ml,混匀,振荡...
摘要:长PCR(longPCR)技术自1994年发明以来,在生命科学发展中发挥了巨大的作用。长PCR技术与常规PCR有较大的区别。本文从长PCR技术的由来、长PCR技术对模板、引物和聚合酶的特殊要求及...
分类和进化研究是生物学中zui古老的领域之一。过去的研究主要依靠生物体的形态,并辅以生理特征,来探讨生物间亲缘关系的远近,有人称之为经典的方法,它是一百多年来完成微生物分类的主要方法。经典的方法是随机...
单个二倍体细胞在分析单精子以前,Li等人对个体二倍体细胞内的β珠蛋白基因进行过研究。两个组织培养细胞株用于这些实验。其中一个纯合是镰刀型细胞密码子6(βS)发生突变,另一个纯合子则来源于正常的βB等位...
随着PCR技术的发展,人们在此基础上建立起了一系列基于基因分离的新技术新方法。如mRNA差别显示技术(DDRT-PCR)、以及进一步改进的代表性差示分析(RAD),抑制性扣除杂交(SSH)和交互扣除R...
对于某些遗传病而言,从双亲继承一个拷贝的突变基因就足以致病。现在,爱荷华大学的研究人员证明有可能在沉默一个基因的突变拷贝的同时不影响另一个正常拷贝的表达。这一发现表明有一天基因沉默技术或许可以用于多种...
RNAi是由双链RNA所引起的序列特异性基因沉默。RNAi首先由Fire等发现于秀丽隐杆线虫(C.elegans)中,他们发现将dsRNA注入线虫体内后可抑制序列同源基因的表达,并证实这种抑制主要作用...
定位克隆(positoinalcloning),又称图位克隆(map-basedclonig),1986年首先由剑桥大学的AlanCoulson提出。用该方法分离基因是根据功能基因在基因组中都有相对较...
放射性同位素标记的DNA序列测定分析测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序,DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用...
一、污染原因(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染...
1、ESTs与基因识别EST技术zui常见的用途是基因识别,传统的全基因组测序并不是发现基因zui有效率的方法,这一方法显得即昂贵又费时。因为基因组中只有2%的序列编码蛋白质,因此一部分科学家支持首先...
在所有RNA实验中,zui关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定,一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA...
蛋白质是生命活动的执行者,细胞内的生理变化都是通过蛋白质来实现的。但是生命活动中各项功能和行为不是由单一的蛋白质来完成的,需要蛋白质与蛋白质,蛋白质与核酸之间的相互作用来实现的。蛋白-蛋白互作网络与转...
极谱法(polarography)通过测定电解过程中所得到的极化电极的电流-电位(或电位-时间)曲线来确定溶液中被测物质浓度的一类电化学分析方法。于1922年由捷克化学家J.海洛夫斯基建立。极谱法和伏...
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