RTE（大鼠气管上皮细胞）实验方法

细胞名称:RTE（大鼠气管上皮细胞）实验方法

细胞形态

多角形

背景描述

生长培养基

MEM(货号:PM150410)＋20% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
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6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
磷酸化丙酮酸脱氢酶α1抗体 phospho-PDHA1(Ser293)
3磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1抗体 PDPK1
磷酸化3磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1抗体 Phospho-PDPK1(Tyr373 + Tyr376)
p53结合蛋白1抗体 p53BP1
磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体 phospho-PKC delta (Tyr52)
磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体 phospho-PKC delta (Thr505/507)
蛋白激酶C zeta 抗体 PKC zeta
嗜酸性粒细胞颗粒关键碱性蛋白抗体 PRG2
胰岛素原抗体 Proinsulin
原蛋白转化酶4抗体 PCSK4
细胞膜钙ATP酶1抗体 PMCA1
磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗体 PCK1
多聚合酶α抗体 PAPOA
多聚合酶g抗体 PAPOG
神经内分泌肽QRFP抗体 QRFP
巯基氧化酶1抗体 Quiescin Q6
喹啉酸磷酸核糖基转移酶抗体 QPRT/QAPRTase
RNA结合蛋白QK1抗体 QK1
维甲酸诱导蛋白3抗体 RAI3
Rap*核苷酸交换因子2抗体 RAPGEF2
Rap*核苷酸交换因子(GEF)5抗体 RAPGEF5/Repac
Rho家族GTP酶2抗体 RND2/Rho7
受体辅助蛋白1抗体 REEP1
环指蛋白135抗体 RNF135
环指蛋白146抗体 RNF146
RAS相关蛋白Rab5B抗体 Rab5b
胞膜间内质网调节蛋白1抗体 RINT1
减数分裂同源蛋白1抗体 RMND1
RAS家族关联结构域蛋白7抗体 RASSF7
环指蛋白74抗体（重组激活基因1） RNF74
重组激活基因2蛋白抗体 RAG2
受体表达蛋白5/息肉相关蛋白抗体 REEP5
P-GP(P-glycoprotein)  P-糖蛋白抗原   0.5mg
Pepsinogen C peptide  *原C蛋白抗原   0.5mg
PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha)  过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗原   0.5mg
PGRN (progranulin)  颗粒蛋白前体抗原   0.5mg
PHB(Prohibitin)  抑制素/肿瘤抑制因子抗原   0.5mg
PKA(Protein Kinase A)  蛋白激酶A(多肽)   0.5mg
PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase)  *型纤溶酶原激活因子（多肽）   0.5mg
Podoplanin Protein  平足蛋白抗原   0.5mg
Pokemon (POK Erythroid Myeloid Oogenic factor)  “扑克蒙”蛋白又称“波克曼”蛋白   0.5mg
Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1)  多囊肾蛋白1抗原   0.5mg
Polycystin 2(polycystic kidney disease 2)  多囊肾蛋白2抗体   0.5mg
phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide  磷酸化蛋白激酶B抗原（*磷酸化位点：473）   0.5mg
RKIP(Raf kinase inhibitor protein)  Raf激酶抑制蛋白抗原   0.5mg
pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus  乙肝病毒pre-X蛋白抗原（N端）   0.5mg
pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus]  乙肝病毒pre-X蛋白抗原（C端）   0.5mg
PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3)  *羟化酶(多肽)   0.5mg
ADAMTS-7(a disiegrin-like and metalloprotease-7 )  新型金属基质蛋白酶(抗原)   0.5mg
Adiponectin  脂联素（多肽片断抗原）