人类成纤维细胞系；CNLMG-B5538SKIN实验方法

细胞名称  人类成纤维细胞系；CNLMG-B5538SKIN实验方法
形态特性   成纤维细胞样　
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法   1:3传代，3-4天传1次
传代情况  C8
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS　
支原体检测  阴性　
STR  
同工酶  
染色体  
使用权限  未定

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
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6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
试验法)    
磷酸甘露糖酶1(PMM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
蛋白O-甘露糖基转移酶2(POMT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
外周蛋白(PRPH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
过氧化还原酶3(PRDX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
过氧化还原酶4(PRDX4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
过氧化还原酶6(PRDX6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
核糖体结合糖蛋白Ⅱ(RPN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Clavesin 1蛋白(CLVS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Clavesin 2蛋白(CLVS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
转胶蛋白3(TAGLN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Anoctamin 4蛋白(ANO4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Anoctamin 3蛋白(ANO3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Hepsin蛋白(HPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Anoctamin 5蛋白(ANO5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Anoctamin 7蛋白(ANO7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
Anoctamin 8蛋白(ANO8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
张力蛋白2(TNS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
张力蛋白3(TNS3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
张力蛋白4(TNS4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    
溶神经素(NLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

 Phospho-Smad3(Ser208)  磷酸化细胞信号转导分子SMAD3抗体 
 SMC1  染色体结构维持蛋白1抗体 
 Phospho-SMC1 (Ser360)  磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体 
 Phospho-SMC1(Ser957)  磷酸化染色体结构维持蛋白质１抗体 
 SMC3/CSPG6  基底膜相关软骨素蛋白多糖抗体 
 SMAD9  SMAD家族9抗体 
 SM-MHC  心肌肌球蛋白抗体（α-myosin） 
 SMMHC/Myosin  平滑肌肌球蛋白重链抗体 
 SMURF2  Smad蛋白E3泛素连接酶2抗体 
 MYPT1/MBS  肌球蛋白磷酸酶抗体 
 Phospho-MYPT1/MBS(Ser507)  磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗体 
 Phospho-MYPT1 (Ser668)  磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗体 
 Phospho-MYPT1(Thr696)  磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗体 
 Phospho-MYPT1 (Thr853)  磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗体 
 SM22 Alpha  细胞骨架相关蛋白抗体 
 Smoothened/SMO  跨膜蛋白Smoothened抗体 
 Regucalcin/SMP30  衰老标记蛋白30抗体 
 Snake(Agkistrodonhaly) poison Protein  蛇毒蛋白抗体（蝮蛇） 
 Snake poison Protein  蛇毒蛋白抗体（中华眼镜蛇） 
 SNAP-25  突触相关蛋白25抗体 
 Syntrophins/SNTA1/Syntrophin Alpha1  神经肌肉接头蛋白SNTA1抗体 
 Snail/SNAI 1  Snail蛋白抗体 
 Twist2  TWIST蛋白2抗体抗体 
 Socs 1  细胞因子信号传导抑制蛋白1抗体 
 Socs 2  细胞因子信号传导抑制蛋白2抗体 
 Socs 3  细胞因子信号传导抑制蛋白3抗体