豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4复苏来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4复苏 | 贴壁生长 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性豹猫的肌肉组织。2004年由*昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%NBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人T细胞活化连接蛋白(LAT)免疫试剂盒 Human LAT ELISA Kit
人Toll样受体3(TLR3)免疫试剂盒 Human TLR3 ELISA Kit
人Toll样受体2(TLR2)免疫试剂盒 human TLR2 ELISA Kit
人Toll样受体1(TLR1)免疫试剂盒 Human TLR1 ELISA Kit
人TH糖蛋白(THP)免疫试剂盒 Human THP ELISA Kit
人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)免疫试剂盒 Human TIEG1 ELISA Kit
人Tau蛋白免疫试剂盒 Human Tau proteins ELISA kit
人TAR DNA结合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫试剂盒 Human TARDBP ELISA Kit
人s腺苷同型半*(SAH)免疫试剂盒 Human S-adenosylhomocysteine,SAH ELISA kit茜素黄GG;间硝基苯偶氮*;媒染黄;偏铬黄;茜素黄G Alizarin yellow GG;Anthracene yellow GG;MetachroMe yellow;2-Hydroxy-5-[(3-nitrophenyl)azo]benzoic acid MonosodiuM salt;C.I. Mordant yellow 1;Salicyl yellow;C.I. 14025 584-42-9
葡聚糖凝胶 G25 SEPHADEX G-10 9050-68-4
葡糖酸内酯 delta-Gluconolactone 90-80-2
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(-20`C) GLUCOSE-6-PHOSPHATE DEHYDROGENASE 9001-40-5
葡萄糖磷酸盐蛋白胨水培养基 NA
葡萄糖琼脂 NA
葡萄糖肉浸液肉汤 Dextrose Meat Infusion Broth
葡萄糖氧化酶(-20°) EC 1.1.3.4 9001-37-0
葡萄糖胰蛋白胨琼脂 NA
普鲁士蓝 Prussian Blue 14038-43-8
氧化钇(阴凉) Yttrium oxide 1314-36-9
茜素紫3B ACID VIOLET 43 4430-18-6