家猫肺细胞；FCA-L2复苏

细胞名称  家猫肺细胞；FCA-L2复苏
形态特性   成纤维细胞样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞系来源于一雄性家猫的肺组织。2000年由*昆明细胞库建立。 
培养条件   M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS
传代方法   1：2传代；3-4天一次
传代情况  P4
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  荧光法（-）
STR   -
同工酶  
染色体  
使用权限  A类

来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量*，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
人β甘露糖苷酶(β Manase)免疫试剂盒    Human β mannosidase,β Manase ELISA Kit
人β-防御素3 免疫试剂盒    Human β-defensins 3 ELISA Kit
人β-防御素2 免疫试剂盒    Human β-defensins 2 ELISA Kit
人β防御素104(DEFB104A)免疫试剂盒    Human DEFB104A ELISA kit
人β-防御素1(DEFB1)免疫试剂盒    Human β-defensins 1 ELISA Kit
人β淀粉状蛋白A4 免疫试剂盒    Human amyloid beta A4 protein ELISA Kit
人β-淀粉样前体蛋白(β-APP)免疫试剂盒    Human β-Amyloid precursor protein,β-APP ELISA kit内消旋-2，3-二溴丁二酸    meso-2,3-Dibromosuccinic acid    608-36-6
内消旋卜菲(IX)二盐酸    MESOPORPHYRIN IX DIHYDROCHLORIDE    68938-72-7
钠标准溶液    Sodium    7440-23-5
尼罗蓝A    CI 51180    3625-57-8
萘-2.3-二甲醛（+4℃）    NAPHTHALENE-2,3-DICARBOXALDEHYDE    7149-49-7
萘酚绿 B;酸性绿O;颜料绿;媒染草绿;1-亚硝基-2-萘酚铁色淀;1-亚硝基-2-萘酚-6-磺酸钠铁盐    Naphthol green B;Acid green 1 Green acid 1;Green PL;1-Nitroso-2-naphthol-6-sodiuM sulfonate ferric salt Naphthol green;C.I. 10020    19381-50-1
脑磷脂(+4℃)    PHOSPHATIDYLETHANOLAMINE    90989-93-8
脑心浸粉    NA    
铌粉    NIOBIUM    7440/3/1
念珠菌显色培养基    NA    
鸟苷    2-Amino-9-beta-D-ribofuranosyl-9H-purine-6-(1H)-one hydrate    118-00-3
鸟苷-3’，5’-环*（+4℃）    GUANOSINE 3':5'-CYCLIC MONOPHOSPHATE SODIUM SALT    40732-48-7