中国仓鼠卵巢细胞-二氢*还原酶缺陷型;CHO/dhFr-复苏来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
产品名称 | 生长特性 | 发货地 | 货期 |
中国仓鼠卵巢细胞-二氢*还原酶缺陷型;CHO/dhFr-复苏 | 贴壁生长 | 上海 | 3-5天 |
细胞名称
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞为二氢*还原酶缺陷型。
培养条件 10%FBS
传代方法 1:4-1:8,每周换液2-3次
传代情况 PN2
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
支原体检测
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人黑色素瘤免疫试剂盒 Human melanoma ELISA Kit
人黑色素免疫试剂盒 Human melanin ELISA kit
人核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族,(肝脏,嗜酸性粒细胞源性神经毒素)(RNASE2)免疫试剂盒 Human RNASE2 ELISA kit
人核糖核酸酶(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫试剂盒 Human ribonuclease pancreatic,RNASE1/RIB1/RNS1 ELISA kit
人核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫试剂盒 Human anti-fibrillarin antibody,AFA/snoRNP/U3RNP ELISA Kit
人核基质蛋白22(NMP-22)免疫试剂盒 Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit
人核黄素激酶(RFK)免疫试剂盒 Human RFK ELISA Kit
人和肽素(copeptin)免疫试剂盒 human copeptin ELISA kit尼泊金乙酯 Ethylparaben 120-47-8
4-羟基苯甲酸丁酯;对羟基苯甲酸丁酯;尼泊金丁酯 Butyl 4-hydroxybenzoate;4-Hydroxybenzoic acid butyl ester;Butoben;Nipagin;Butylparaben;Butyl cheMosept;Butyl parasept 94-26-8
对三氟甲氧基苯异氰酸酯 4-(TrifluoroMethoxy)phenyl isocyanate 35037-73-1
对硝基苯-α-D-半乳糖苷 4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GALACTOPYRANOSIDE 7493-95-0
对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(-20℃) 4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GLUCOPYRANOSIDE 3767-28-0
4-溴联苯;对溴联苯 4-BroMobiphenyl;4-BroModiphenyl 92-66-0
对乙酰基氨基苯磺酰叠氮化物 4-Acetamidobenzenesulfonyl azide 2158-14-7
吨氢醇(+4℃) 9-Hydroxyxanthene 90-46-0
聚蛋白胨 POLYPEPTONE
三磷酸五钠 Sodium tripolyphosphate 7758-29-4