【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1培养
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 1957年,Puck TT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞,CHO-K1是CHO的一个亚克隆。CHO-K1的生长需要*。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 新生牛血清,10%
传代方法 1:4-1:8
传代情况
冻存条件 基础培养液+20%牛血清+10%DMSO
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
产品名称 | 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1培养 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1培养复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1培养操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
对硝基苯β-D葡萄糖吡喃糖苷 (-20℃) NA
对硝基苯甲醇 4-Nitrobenzyl alcohol 619-73-8
4-硝基苯甲醛;对硝基苯甲醛 4-Nitrobenzaldehyde 555-16-8
4-硝基碘苯 1-Iodo-4-nitrobenzene 636-98-6
4-硝基甲苯;对硝基;对硝基甲苯 4-Nitrotoluene;p-Nitrotoluol;Methyl-p-nitrobenzene;Methyl-p-nitrobenzol 99-99-0
对溴苯磺酰氯 4-Bromobenzenesulfonyl chloride 98-58-8
4-溴苯甲醚;对溴苯甲醚;1-溴-4-甲氧基苯;对溴茴香醚 4-BroMoanisole;p-BroMoanisole;1-BroMo-4-Methoxybenzene;p-BroMophenol Methyl ether 104-92-7
4-溴苯甲醛;对溴苯甲醛 4-BroMobenzaldehyde 1122-91-4
对溴苯甲酸 4-Bromobenzoic acid 586-76-5
对溴碘苯 1-Bromo-4-iodobenzene 589-87-7
1-溴-4-氟苯 4-Bromofluorobenzene 460-00-4人核因κB抑制物激酶β(IKK-β)免疫试剂盒 Human IKK-β ELISA kit
人核因κB抑制物激酶α(IKK-α)免疫试剂盒 Human IKK-α ELISA kit
人核因κB(NF-κB)免疫试剂盒 Human NF-κB ELISA Kit
人核心结合因α1,CBFA1/RUNX2 免疫试剂盒 Human Core Binding Factor alpha1 CBFA1/RUNX2 ELISA Kit
人核心蛋白聚糖(DCN)免疫试剂盒 Human Decorin/Bone proteoglycan II,DCN ELISA Kit
人核糖体合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫试剂盒 Human NSA2 ELISA Kit
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1培养人核糖体蛋白S9(RPS9)免疫试剂盒 Human ribosomal protein S9,RPS9 ELISA kit
人核糖体蛋白S25(RPS25)免疫试剂盒 Human ribosomal protein S25,RPS25 ELISA kit
人核糖核酸抑止剂(RNH1/PRI/RNH)免疫试剂盒 Human Ribonuclease inhibitor,RNH1/PRI/RNH ELISA Kit