【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1008培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代；5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
| 产品名称 | EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1008培养 |
| 货期 | 3－5天 |
| 发货地 | 上海 |
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
IFIT1 英文名称： 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白1抗体 ?0.2ml
IDH3G 英文名称： 异柠檬酸脱氢酶gamma亚基抗体 ?0.2ml
IDN3 英文名称： Bipped B样蛋白抗体 ?0.2ml
Iduronate 2 sulfatase 英文名称： 艾杜糖-2-硫酸酯酶抗体 ?0.2ml
IDUA 英文名称： α-L-艾杜糖苷酶抗体 ?0.2ml
IFT122 英文名称： 细胞纤毛内转运同源蛋白122抗体 ?0.2ml
IFT140 英文名称： 细胞纤毛内转运同源蛋白140抗体 ?0.2ml
IFT20 英文名称： 细胞纤毛内转运同源蛋白20抗体 ?0.2ml
IFT43 英文名称： 细胞纤毛内转运同源蛋白43抗体 ?0.2ml
IFT80 英文名称： 细胞纤毛内转运同源蛋白80抗体 ?0.2ml
CD101 英文名称： CD101抗体 ?0.1ml
IGSF5 英文名称： 免疫球蛋白超家族成员5抗体 ?0.2ml
IFI27L2 英文名称： alpha干扰素诱导蛋白27样蛋白2抗体 ?0.2ml
Insulin 英文名称： 胰岛素抗体 ?0.1mlVCAM-1/CD106(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞粘附分子1 Multi-class antibodies 规格： 48T
GR(Mouse glucocorticoid receptor) ELISA Kit 小鼠糖皮质类固醇受体 Multi-class antibodies 规格： 48T
LHRH(Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 小鼠黄体生成素释放激素 Multi-class antibodies 规格： 48T
NGB(Mouse Neuroglobin) ELISA Kit 小鼠脑红蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
8-iso-PG(Mouse 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 小鼠8异前列腺素 Multi-class antibodies 规格： 48T
IFI16/p16(Mouse interferon-inducible protein 16) ELISA Kit 小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16 Multi-class antibodies 规格： 48T
SDF-1a/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit 小鼠基质细胞衍生因子1a Multi-class antibodies 规格： 48T
VEGF(Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子 Multi-class antibodies 规格： 48T
GMP-140(Mouse alpha-granular membrane protein) ELISA Kit 小鼠血浆α颗粒膜蛋白 Multi-class antibodies 规格： 48T
MPO(Mouse myeloperoxidase) ELISA Kit 小鼠髓过氧化物酶 Multi-class antibodies 规格： 48T
Gzms-B(Mouse granzymes B) ELISA Kit 小鼠颗粒酶B Multi-class antibodies 规格： 48T
VEGFR-1/Flt1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子受体1 Multi-class antibodies 规格： 48T
