单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth)50 次实验方法产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth)50 次实验方法产品介绍：
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth)50 次实验方法合成建文库用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth)50 次实验方法按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。
纸上层析条件：
展开剂：正丁醇：无水乙醇：氨水（1%）=6：2：3
温度：20～25℃
试液浓度：0.1g/100ml
试液用量：0.002ml
展开剂前沿上升限度：150mmm
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：橙红色均匀粉末或颗粒，无臭。易溶于水（6.9%，0℃）、甘油、丙二醇，微溶于乙醇、不溶于油脂。水溶液呈黄橙色。在柠檬酸、酒石酸中稳定，还原时褪色。0.1%水溶液呈橙黄色。耐光性，耐热性，耐酸性非常强，耐碱性尚好，但遇碱呈红褐色。
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
丽丝胺罗丹明B
〖英文名称〗：Lissamine rhodamine B ；Sulforhodamine B；Lissamine rhodamine B200；Lissamine rhodamin；Acid rhodamine B；Xylene red B；Acid Red 52；Sulforhodamine B monosodium salt
〖其他名称〗：酸性罗丹明B；酸性红52；二甲苯红B；丽丝胺玫瑰红B；里斯沙明玫瑰红B200；李斯曼罗丹明B；李斯曼若丹明B；丽丝胺碱性蕊香红B200；酸性玫瑰红B；酸性桃红B；柴林红B；磺化罗丹明B；奇通红S；硫罗丹明B
〖CAS号〗：3520-42-1
C27H29N2NaO7S2=580.65
单酶一管式 RT-PCR 试剂盒 (Tth)50 次实验方法加 T 试剂盒 一站式磁珠法动物 mRNAout
DNA 粘转平试剂盒 无包被磁珠
非酶 DNA 清除剂 硅基磁珠
柱式 DNA 胶回收试剂盒 氨基磁珠
柱式 DNA 胶回收试剂盒 羧基磁珠
硫酸*干粉 环氧基磁珠
非酶多糖清除剂 (RNA ) 醛基磁珠
柱式质粒 DNAout 基磁珠
柱式质粒 DNAout 壳聚糖磁珠
氨苄*溶液 ,50mg/mL 链霉亲和素磁珠
*溶液 ,25mg/mL 蛋白磷酸酶抑制剂混合液 2
硫酸*溶液
