牛结核病抗体(TB-Ab)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在牛结核病抗体(TB-Ab)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
14655 整合素α7(ITGα7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha 7 (ITGa7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14656 整合素α8(ITGα8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha 8 (ITGa8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14657 整合素α9(ITGα9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha 9 (ITGa9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14658 整合素α10(ITGα10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha 10 (ITGa10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14659 整合素α11(ITGα11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha 11 (ITGa11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14660 整合素β5(ITGβ5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Beta 5 (ITGb5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14661 整合素β7(ITGβ7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Beta 7 (ITGb7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14662 整合素β8(ITGβ8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Beta 8 (ITGb8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14663 腱蛋白(CHRD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chordin (CHRD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14664 神经秩蛋白(NRTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurturin (NRTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14665 神经蛋白聚糖(NCAN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurocan (NCAN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14666 早老素1(PSEN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Presenilin 1 (PSEN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14667 连环蛋白α1(CTNNα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Catenin Alpha 1 (CTNNa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14668 两性蛋白(AMPH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amphiphysin (AMPH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14669 组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 1 (HDAC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14670 Vav1癌基因(VAV1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vav 1 Oncogene (VAV1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14671 辅肌动蛋白α4(ACTN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actinin Alpha 4 (ACTN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14672 Atrophin 1蛋白(ATN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Atrophin 1 (ATN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14673 类固醇生成因子1(SF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Steroidogenic Factor 1 (SF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14674 皮层肌动蛋白(CTTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cortactin (CTTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14675 斑联蛋白(ZYX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Zyxin (ZYX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14676 辅肌动蛋白α1(ACTN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actinin Alpha 1 (ACTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14677 脱氧核糖核酸酶Ⅱ(DNASEⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease II (DNASEII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14678 Pirin蛋白(PIR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pirin (PIR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14679 输出蛋白1(XPO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exportin 1 (XPO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14680 融合蛋白(FUS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fusion (FUS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14681 7-脱氢*还原酶(DHCR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 7-Dehydrocholesterol Reductase (DHCR7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14682 氨基酰化酶1(ACY1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aminoacylase 1 (ACY1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14683 内收蛋白1(ADD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adducin 1 (ADD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14684 腺苷激酶(ADK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adenosine Kinase (ADK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14685 腺苷酸激酶2(AK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adenylate Kinase 2 (AK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14686 无羊膜蛋白(AMN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amnionless (AMN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14687 血管抑素结合蛋白(AMOT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiomotin (AMOT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14688 Attractin蛋白(ATRN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Attractin (ATRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14689 失调蛋白2(ATXN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ataxin 2 (ATXN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14690 抗酶抑制因子1(AZIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Antizyme Inhibitor 1 (AZIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14691 Aprataxin蛋白(APTX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aprataxin (APTX) 48T/96T Homo sapiens 牛结核病抗体(TB-Ab)ELISA试剂盒(Human)
14692 天冬酰胺氨基葡萄糖酶(AGA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aspartylglucosaminidase (AGA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5牛结核病抗体(TB-Ab)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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