红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
14371 分拣连接蛋白14(SNX14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 14 (SNX14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14372 分拣连接蛋白16(SNX16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 16 (SNX16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14373 矢车菊苷β6(CENTβ6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Centaurin Beta 6 (CENTb6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14374 白介素1θ(IL1θ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Theta (IL1F10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14375 纹蛋白3(STRN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Striatin 3 (STRN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14376 B-黑色素瘤抗原2(BAGE2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Melanoma Antigen 2 (BAGE2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14377 死亡因子4(MORF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mortality Factor 4 (MORF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14378 防御素β126(DEFβ126)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 126 (DEFb126) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14379 钙黏蛋白26(CDH26)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin 26 (CDH26) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14380 Sideroflexin 5蛋白(SFXN5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sideroflexin 5 (SFXN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14381 胞浆磷蛋白4(STMN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stathmin 4 (STMN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14382 Sideroflexin 2蛋白(SFXN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sideroflexin 2 (SFXN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14383 Sideroflexin 3蛋白(SFXN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sideroflexin 3 (SFXN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14384 Sideroflexin 4蛋白(SFXN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sideroflexin 4 (SFXN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14385 防御素β127(DEFβ127)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 127 (DEFb127) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14386 Isthmin 1蛋白(ISM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Isthmin 1 (ISM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14387 防御素β129(DEFβ129)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 129 (DEFb129) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14388 SHC-转化蛋白4(SHC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for SHC-Transforming Protein 4 (SHC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14389 矢车菊苷β5(CENTβ5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Centaurin Beta 5 (CENTb5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14390 孤儿素磷酸酶1(PHOSPHO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphatase, Orphan 1 (PHOSPHO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14391 *脱氢酶2(PRODH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proline Dehydrogenase 2 (PRODH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14392 Neugrin蛋白(NGRN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neugrin (NGRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14393 防御素β110(DEFβ110)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 110 (DEFb110) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14394 防御素β113(DEFβ113)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 113 (DEFb113) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14395 防御素β114(DEFβ114)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 114 (DEFb114) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14396 防御素β115(DEFβ115)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 115 (DEFb115) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14397 防御素β116(DEFβ116)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 116 (DEFb116) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14398 防御素β119(DEFβ119)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 119 (DEFb119) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14399 防御素β121(DEFβ121)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 121 (DEFb121) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14400 防御素β123(DEFβ123)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 123 (DEFb123) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14401 防御素β124(DEFβ124)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 124 (DEFb124) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14402 防御素β125(DEFβ125)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 125 (DEFb125) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14403 防御素β128(DEFβ128)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 128 (DEFb128) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14404 防御素β130(DEFβ130)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 130 (DEFb130) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14405 防御素β131(DEFβ131)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 131 (DEFb131) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14406 TAO激酶3(TAOK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TAO Kinase 3 (TAOK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14407 Midasin蛋白(MDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Midasin (MDN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14408 *组合因子5(SERINC5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serine Incorporator 5 (SERINC5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14409 突触囊泡蛋白Ⅹ(SYT10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synaptotagmin X (SYT10) 红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)ELISA试剂盒48T/96T Homo sapiens (Human)
14410 核糖核酸酶A10(RNASE10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A10 (RNASE10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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