牛蛙生长激素（GH）ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在牛蛙生长激素（GH）ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
14250 Nesprin 3蛋白(Nesp3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nesprin 3 (Nesp3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14251 滑行蛋白γ(TXLNγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Taxilin Gamma (TXLNg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14252 POLQ样蛋白解旋酶(HELQ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Helicase, POLQ-Like Protein (HELQ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14253 原钙黏素24(PCDH24)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protocadherin 24 (PCDH24) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14254 Talanin蛋白(TALN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Talanin (TALN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14255 Twist邻位子(TWISTNB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TWIST Neighbor (TWISTNB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14256 APEX核酸酶2(APEX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for APEX Nuclease 2 (APEX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14257 二氢二醇脱氢酶(DHDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dihydrodiol Dehydrogenase (DHDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14258 唾液酸转移酶8E(SIAT8E)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 8E (SIAT8E) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14259 Ropporin 1蛋白(ROPN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ropporin 1 (ROPN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14260 Gremlin 2蛋白(GREM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gremlin 2 (GREM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14261 封闭蛋白23(CLDN23)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 23 (CLDN23) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14262 Axotrophin蛋白(AXOT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Axotrophin (AXOT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14263 54kDa核孔蛋白(NUP54)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 54kDa (NUP54) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14264 Osterix蛋白(OSX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osterix (OSX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14265 核糖核酸外切酶3(ERI3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exoribonuclease 3 (ERI3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14266 RAB11家族相互作用蛋白3(RAB11FIP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RAB11 Family Interacting Protein 3 (RAB11FIP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14267 磷脂酶D3(PLD3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase D3 (PLD3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14268 磷酸甘油酸变位酶4(PGAM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphoglycerate Mutase 4 (PGAM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14269 Lunapark蛋白(LNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lunapark (LNP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14270 Spacemaker蛋白(SPAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Spacemaker (SPAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14271 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 14 (GALNT14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14272 43kDa核孔蛋白(NUP43)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 43kDa (NUP43) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14273 Lengsin蛋白(LGSN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lengsin (LGSN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14274 Membralin蛋白(MBRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Membralin (MBRL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14275 G底物(GSBS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for G Substrate (GSBS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14276 核仁蛋白14(4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 14 (4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14277 信号素6D(SEMA6D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 6D (SEMA6D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14278 钙蛋白酶14(CAPN14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 14 (CAPN14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14279 钙蛋白酶13(CAPN13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 13 (CAPN13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14280 核黄素转运蛋白2(RFT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Riboflavin Transporter 2 (RFT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14281 R-脊椎蛋白4(RSPO4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for R-Spondin 4 (RSPO4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14282 硫氧还蛋白1(SRXN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sulfiredoxin 1 (SRXN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14283 Trihydrophobin 1蛋白(TH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trihydrophobin 1 (TH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14284 MRG结合蛋白(MRGBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for MRG-Binding Protein (MRGBP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14285 Paralemmin 2蛋白(PALM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Paralemmin 2 (PALM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14286 原钙黏素22(PCDH22)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protocadherin 22 (PCDH22) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14287 Zinedin蛋白(ZIN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Zinedin (ZIN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14288 Vang样蛋白2(VANGL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vang Like Protein 2 (VANGL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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