细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介:
小鼠气管软骨分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C”字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。软骨由软骨细胞和细胞间质组成。软骨内的基质呈凝胶状态,具有较大韧性。软骨是以支持作用为主的结缔组织。软骨内不含血管和淋巴管,营养物由软骨膜内的血管中渗透到细胞间质中,再营养骨细胞。根据细胞间质的不同可把软骨分为3种,即透明软骨、弹性软骨和纤维软骨。透明软骨的基质是由胶原纤维、原纤维和周围无定形的基质组成。在胚胎时期有临时支架作用,后来这种作用被骨代替。成人的透明软骨主要分布在气管和支气管壁中、肋骨的胸骨端和骨的表面(关节软骨)。
方法简介:
实验室分离的小鼠气管软骨采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的小鼠气管软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | |
组织来源 | 气管 | 产品货号 | YS-01X8525 |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每3-4天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
小鼠气管软骨体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
公司正在出售的产品:
大鼠弹性蛋白(ELN)试剂盒 ,英文名: ELN ELISA Kit
Porcine thrombomodulin (TM) ELISA Kit 猪血栓调节蛋白(TM)试剂盒
ELISA 小鼠雄激素结合蛋白(mouse ABP) 分装
CLIAKitforLPO(Humanlipidperoxlde)ELISAKit人过氧化脂质/乳过氧化物酶
通用细胞载玻片制备试剂盒50次
ELISAKitLH鸡促黄体激素
血栓前体蛋白 英文名称: thrombus precursor protein 英文缩写: TpP
可溶性髓系细胞触发受体-1 英文名称: soluble iggering receptor expressed on myeloid cells-1 英文缩写: sEM-1
胸苷酸合成酶 英文名称: thymidylate syhase 英文缩写: TS
敏感蛋白-1 英文名称: thrombospondin 1 英文缩写: TSP-1
叉头相关结构域包含蛋白1抗体
ATP依赖的干扰素反应蛋白1抗体
XCL1重组小鼠 XCL1 蛋白 Protein
白介素2(IL2)重组蛋白 Recombinant Interleukin 2 (IL2)
CKB重组人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白 Protein
CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 标签)
IL2RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL2RA 蛋白
Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mgApelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原
CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 标签)
EPHA4重组小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 Protein
CD70 Protein Rat 重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 标签)
MFGE8重组人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 Protein
小鼠气管软骨细胞小鼠脂多糖(LPS)pcr检测试剂盒
Human ai hepatitis B virus core aibody (HBcAb) ELISA Kit 人抗乙型肝病毒核心抗体(HBcAb)试剂盒
HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISAKit 人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforAAA(Humanai-albuminaibody)ELISAKit人抗白蛋白抗体
中和液100毫升
MouseneuropeptideY,NP-YELISAKit小鼠神经肽Y(NP-Y)试剂盒规格:96T/48T
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取