人乳头瘤病毒 抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
使 用 说 明（96T/48T）
[原理]
本试剂盒采用亲和素-素化 HPV 衣壳蛋白 L1 抗原预包被板 ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的 HPV-IgM 抗体，并配以酶标记抗人 IgM u 链单克隆抗体 作为标记物。加入底物 TMB 显色后终止反应，在 450nm 波长测各孔 O.D 值，O.D 值的大小与待检抗体含量成正 比。素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大 作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高； 另外，血清/血浆经预吸收后非特异性因素（如 RF 因子 和变性或聚合的人 IgM）的影响被底消除，经验证其 结果全等同于 capture-ELISA,为本试剂盒之特点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的 HPV-IgM 抗体。
[试剂盒组成]
1 素化抗原预包被板 1 块（8X12/4X12）
2 、阴性对照血清 1 瓶
3 、阳性对照血清 1 瓶
4 、标本稀释液 1 瓶（20 ml/10ml ，直接使用）
5 、酶结合物 1 瓶（10/5ml ，直接使用）
6 、30X 浓缩洗液
1 瓶（20/10ml ，加蒸馏水 1 ：30 稀释使用）
7 、显示剂 A 、B 液 各 1 瓶（5/2.5ml）
8 、终止液（2M H2SO4 ） 1 瓶（5/2.5ml）
9 、说明书 1 份
[操作步骤]
1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架 上。
2. 样本稀释：用标本稀释液以 1 ：101（2ul—200ul）稀 释标本（不留吸嘴），混匀后吸取 100ul 上清液加 入到各反应孔（或每孔加 200ul 标本稀释液，再分 别加入 2ul 标本于相应孔中，震荡或轻拍混匀）。 设阴、阳性对照（各 100ul）及空白对照（加 100ul 标本稀释液）各一孔。轻拍混匀。
3. 37℃温育 30 分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板 3 次并在吸水纸上拍干。
4. 加酶结合物：每孔 2 滴（或 100ul），混匀后置 37℃ 温育 30 分钟。同上法洗涤 3 次并拍干。
5. 显色：每孔加显色剂 A、B 各 1 滴（或 50ul），轻拍 混匀（或震荡器混匀）后置 37℃10 分钟。
[结果判断]
1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为 阳性，无色者为阴性。
2. 酶标仪测定：每孔加终止液 1 滴（或 50ul），混匀后 在 450nm 下测定各孔 O.D 值。
（1）P/N=标本 O.D 值/ 阴性对照 O.D 值。
（2）P/N≥2. 1 为阳性；
（3）1.5≤P/N<2. 1 为可疑标本; P/N<1.5 为阴性。
（4）阴性对照(NC)小于 0.10 时以 0.10 计, 大于 0.1 小于 0.21 时以实际 O.D 值计算 ;若大于 0.21 时, 实验可能出现了较大误差,需重复实验。
（5）阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重 做。
[注意事项]
1. 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温 平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。
2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身 垂直。
3. 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。
4. 试剂置 2-8℃存放，不能冻结，有效期 10 个月。
5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。
6. 用新鲜标本，如需保存，可于 2-8℃冷藏 48 小时 或-20℃冻存 4 周（样本应避光）。
