链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点
描述:
量子点标记的链霉亲和素(QS系列产品)由链霉亲和素与带官能团的活性量子点共价偶联得到。链霉亲和素与有高度的亲和力与性,利用-亲和素系统,将量子点标记的链霉亲和素与化的抗体、核酸、受体结合,可把量子点标记到细胞、核酸、上进行示踪检测及功能研究,为量子点的应用提供一种通用的标记物。其应用范围包括:显微成像、蛋白印迹、流式细胞及动态示踪。
摘要:
目的:探讨链霉亲和素修饰的CdSe–ZnS量子点对聚合酶链反应的影响。
方法:将链酶亲和素修饰的量子点浓度进行稀释观察其对于聚合酶链反应体系的浓度效应;反应体系中含有浓度的链酶亲和素修饰的量子点,在不同的退火温度下进行扩增,观察链酶亲和素修饰的量子点对退火温度的影响;将不同浓度的BSA加入到含有浓度的链酶亲和素修饰的量子点的反应体系中,观察BSA的影响作用;将不同的Taq酶与不同浓度链酶亲和素修饰的量子点组合,观察对扩增体系的影响。
结果:浓度链霉亲和素修饰的量子点可以聚合酶链反应的扩增效率,拓宽PCR的退火温度范围;BSA可以逆转链霉亲和素修饰的量子点对于PCR的优化作用;量子点可能是与Taq酶相互作用,来影响PCR的扩增效能。结论:浓度的链霉亲和素修饰的量子点可以优化PCR的反应体系。
1.1株金色葡球閑9
1.2主要试剂量子点SA- Cdse/ns525。PCR反应试剂。
1.2方法
1.2.1PCR扩增在高压火菌的 Eppendoff管中,50l的反应体系,其中含有50mmol/LKC,10mmol/LTisC,1.5mmol/.Mg(2和0.4mmol/I.的dNTP混合物,上游和下游引物均为0.2ml/L,DNA聚合酶0.02U/ul,链亲和素修饰的量子点的用量依据实验需要确定。在PF2400PCR扩增仪上进行循环扩增。量子点的浓度进行系列优化,观察其对PCR扩增的影响,对退火温度进行系列调整观察其対PCR扩增的影响。
1.2.2扩増产物检测将扩增后的 Eppendol管离心后,取5u上清液在1.5%的琼脂糖凝胶含0.5g/ml.B)中,于1xTBE缓冲液中电泳.在生物电泳图像分析系统观察结果并照相。
2结果
2.1不同浓度的SA-CdSeZ.nS525量子点对PCR扩增结果的影响
我们将SA- Cdse/ns525量子点的浓度进行系列稀释,使其在50PCR反应体系中的终浓度分别为0. 2 nmol/L: 0.4 nmol/L: 0.6 nmol/: 0. 7nmol/0.8mmol/,分别加入到PCR反应体系中,DNA聚合酶0.02U/l,观察其对扩增体系的影响,结果发现扩增体系中含有量的链亲和素修饰的量子点可以扩增效能
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