产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
DAO二胺氧化酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/48样 | FS-01S63316 |
商品介绍:
测定意义
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
测定原理:
DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成有色物质,在460nm处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算DAO活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品:
血小板亲和蛋白1(PKP1)联免疫试剂盒大肠埃希Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (D7T2V) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
血小板亲和蛋白2(PKP2)联免疫试剂盒巨大芽孢杆Cleaved Lamin A (Asp230) Antibody
血管生成样蛋白8(ANGPTL8)联免疫试剂盒地衣芽胞杆Lamin A/C Antibody
血小板相关补体3(PAC3)联免疫试剂盒 谢瓦曲霉Lamin A/C Antibody
血小板相关抗体IgM(PA-IgM)联免疫试剂盒 草假单胞DHCR24/Seladin-1 (C59D8) Rabbit mAb
血小板相关球蛋白(PAIg)联免疫试剂盒 弗氏链霉Cleaved Lamin A (Small Subunit) Antibody
血小板型磷果糖激(PFKP)联免疫试剂盒木菇属Cleaved Lamin A (Small Subunit) (30H5) Mouse mAb
血小板衍生生长因子(PDGF)联免疫试剂盒瓜果腐霉GFP (D5.1) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)
血小板衍生生长因子C(PDGFC)联免疫试剂盒酿酒酵母PP2A C Subunit Antibody
血小板衍生生长因子D(PDGFD)联免疫试剂盒优美毡被PP2A C Subunit Antibody
血小板衍生生长因子受体α(PDGFRα)联免疫试剂盒黄色孢链霉PP2A A Subunit Antibody
血小板因子4(PF4)联免疫试剂盒克罗诺杆属Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (HRP Conjugate)
血小板因子4变种1(PF4V1)联免疫试剂盒嗜热侧孢霉PP2A A Subunit (81G5) Rabbit mAb
血型糖蛋白E(GYPE)联免疫试剂盒罗伦隐球酵母PP2A A Subunit (81G5) Rabbit mAb
生长抑受体4(SSTR4)联免疫试剂盒开菲尔乳杆XIAP Antibody
DAO二胺氧化酶检测试剂盒微量法脂肪 10万U/g乙二二甲 CP ,99%Anti-CG6856/CG6856-PA/FITC 荧光标记兔抗果蝇CG6856-PA抗体IgG
胰脂肪 牛胰腺,powder, 15-35 units/mg乙二二甲 光谱纯, ≥99.5%Anti-CGB/FITC 荧光标记嗜铬粒B抗体IgG
果胶 3万U/g乙二二甲 分析标准品,≥99.7% (GC)Anti-CGP-39/YKL-40/FITC 荧光标记软骨糖蛋白39抗体IgG
偏铝钠 AR乙二二甲 for HPLC, 99.5%Anti-CGRP/FITC 荧光标记降钙基因相关肽抗体IgG
L-色 99%二乙二二甲 >99.0%(GC)Anti-ChAT/FITC 荧光标记ChAT抗体IgG
DL-色 99%二乙二二甲 standard for GC, ≥99.5% (GC)Anti-CHK1/FITC 荧光标记抗周期检测点激1抗体IgG
D-色 98%二乙二二甲 ≥99.5% (GC)Anti-CHK2/Cds1 /FITC 荧光标记抗周期检测点激2抗体IgG
纳他霉 ≥95% (HPLC)二乙二二甲 无水级, 99.5%Anti-Phospho-CHK2 (Thr68)/FITC 荧光标记磷化周期检测点激2抗体IgG