产品属性：
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
LPS脂肪酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63521 |
商品介绍：
测定意义
LPS又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS广泛的存在于各种生物中。对于人来说，主要是胰脂肪酶，分解食物中脂肪形成单酰甘油和游离脂肪酸，被人体吸收并重新合成脂肪。外源性脂质摄入过多是引发肥胖的重要原因，血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。
测定原理
LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。
实验中所需仪器和用品
甲苯、无水乙醇、研钵、冰、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪和双蒸水。
产品内容：
公司产品仅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存
试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；
试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；
试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；
试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；
试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤：
一、NAD+和 NADH 的提取：
1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。
NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。
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LPS脂肪酶检测试剂盒微量法乙二 99.4%钠 分析标准品PLGF (Placenta growth factor fragment)(human) 人胎盘生长因子（多肽抗原）
三乙二二甲 99%钠 99%PP-1 蛋白磷酯-1（抗原）
四乙二二甲 99%钠 用于昆虫培养, ≥99.0%BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受体1A抗原
四乙二二甲 standard for GC ,≥99.5% (GC) 对醌 97%PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor) D型-过氧化活化增生受体(多肽）
四乙二二甲 matrix substance for MALDI-MS, ≥99.5% (GC)亚磺钠 98%PP-2A (protein phosphatase 2A) 蛋白质磷-2A（抗原）
三乙二乙 95%对甲亚磺钠 98%，无水物BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B特异性转录因子抗原
间二 99%对甲亚磺钠 98%，水合物PP-2B alpha 1 蛋白磷酯-2B 催化亚单位（抗原）
氧化铝 99.998% metals basis ,5～6μm,粉末三氟磺 98%PR (Progestogerone receptor) 孕受体（抗原）
注意事项：
1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。
