产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
HK己糖激酶检测试剂盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | FS-01S63488 |
商品介绍:
测定意义
HK(EC 2.7.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶,催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。
测定原理
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品:
小鼠Sestrin 3蛋白 (SESN3) 试剂盒Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体
小鼠性别决定区Y框蛋白3(SOX3) 试剂盒Human GP5(Plaet glycoprotein V) ELISA Kit肉棕榈酰基转移2抗体
小鼠性结合球蛋白(SHBG)试剂盒Human KL(Klotho) ELISA Kit肉氧位甲基转移抗体
小鼠唾液结合球蛋白样凝集3(SIGLEC3) 试剂盒Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA KitIV型胶原α3结合蛋白抗体
小鼠唾液结合球蛋白样凝集12(SIGLEC12)试剂盒 Human SEPT5(Septin-5) ELISA Kit肉棕榈酰基转移1B抗体
小鼠信号识别颗粒(SRP10)试剂盒Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA Kit胆固27α羟化抗体
小鼠信号转导子和转录激活子1(STAT1)试剂盒Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA Kit胆固24α7羟化抗体
小鼠信号转导子和转录激活子2(STAT2)试剂盒Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA Kit色P450 4A1抗体
小鼠信号转导子和转录激活子3(STAT3)试剂盒Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit色P4504A22抗体(脂肪Ω羟化)
小鼠信号转导子和转录激活子4(STAT4)试剂盒Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit周期蛋白依赖性激抑制剂2D抗体
小鼠信号转导子和转录激活子5A(STAT5A)试剂盒Human APLN(Apelin) ELISA Kit胆固24S-羟化
小鼠信号转导子和转录激活子6B(STAT6B)试剂盒Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit猪瘟病抗体
小鼠信号转导子和转录激活子6(STAT6)试剂盒Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit色c氧化亚型2抗体
小鼠Smad同源物1(Smad1)试剂盒Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit周期G2抗体
小鼠鸟酰转移(OCT)试剂盒Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit铜蓝蛋白抗体
HK己糖激酶检测试剂盒紫外分光光度法乙钙 AR,99%3,5-二苄氧基甲 98%Anti-PEDF /FITC 荧光标记色上皮源性因子抗体IgG
乙钙 CP,98%3-羟基-2-甲 98%Anti-pEGFR(pTyr1068)/FITC 荧光标记抗磷化表皮生长因子受体抗体IgG
二甲基亚砜 for HPLC, ≥99.7%2-异氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂烷 98%Anti-PEG3/FITC 荧光标记PEG3蛋白抗体IgG
乙 AR,99.0%过氧化氢 3500 units/mg Anti-PEG10 /FITC 荧光标记肝癌高表达基因抗体IgG
双乙钠 99%干冰,块状,146*88*20Anti-PENK/Enkephalin A/FITC 荧光标记脑啡肽抗体IgG
乙钠,三水 AR,99%氢气减压阀Anti-Peptide YY/PYY/FITC 荧光标记酪酪肽抗体IgG
乙钠,三水 GR,99.5%苄嘧磺隆 分析标准品Anti-PEPT1/FITC 荧光标记肠道肽转运蛋白1/小肽转运蛋白1抗体IgG
乙钠,三水 ACS,99.0-101%胃蛋白(猪源) 1:3000Anti-PEPT2 /FITC 荧光标记肠道肽转运蛋白2/小肽转运蛋白2抗体IgG