产品属性：
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
MDHm线粒体苹果酸脱氢酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63471 |
商品介绍：
测定意义
MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。
测定原理：
MDHm催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
产品内容：
公司产品仅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存
试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；
试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；
试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；
试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；
试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤：
一、NAD+和 NADH 的提取：
1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。
NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品：
甲状腺(T4)试剂盒Anti-MIA Antibody鱼类促性腺释放
降钙原(PCT)试剂盒 Anti-MID1 Antibody兔骨保护
血小板生成(TPO)试剂盒Anti-MINK1 Antibody小鼠小扁豆结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3
血管内皮生长因子C(VEGF-C)试剂盒Anti-MINK1 Antibodyβ
血管内皮生长因子D(VEGF-D)试剂盒Anti-MINPP1 Antibody大鼠胞浆型磷脂A2
血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/KDR)试剂盒Anti-MINPP1 Antibodyα
胰岛(INS)试剂盒 Anti-MKI67 Antibody鱼类状腺原
球蛋白G1(IgG1)试剂盒Anti-MKI67 Antibody兔胰淀
球蛋白G2(IgG2)试剂盒Anti-MKNK2 Antibody小鼠小扁豆结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2
球蛋白G3(IgG3)试剂盒Anti-MKNK1 Antibody大鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽
球蛋白G4(IgG4)试剂盒Anti-MKNK1 Antibody大鼠肌钙蛋白T
球蛋白M(IgM)试剂盒 Anti-MLF1 Antibody兔心肌肌钙蛋白Ⅰ
热休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)试剂盒 Anti-MLST8 Antibody小鼠小扁豆结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1
热休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)试剂盒 Anti-MLANA AntibodyCC趋化因子受体1
热休克蛋白40(HSP-40)试剂盒 Anti-MLNR Antibody鱼类皮质
MDHm线粒体苹果酸脱氢酶检测试剂盒微量法乙正己酯 分析标准品,≥99.5% (GC) 椰子 98%, FCC, KosherAnti-E2F5 转录因子E2F-5抗体
叶酯 97%橙花 97%Anti-E2F6 转录因子E2F6抗体
柳己酯 98%乙位萘乙 99%Anti-E2 tag E2 tag标签抗体
己异戊酯 98%乙位萘乙 食品级,KosherAnti-HPV16 E7 protein 人瘤病16型E7抗体
异戊异戊酯 98%反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)Anti-EAAT1/Glast 胶质谷运载蛋白1抗体
异丁 standard for GC, ≥99.5% (GC)正壬 96%Anti-EAAT2 胶质谷运载蛋白2抗体
异丁 ≥99%, FCC正壬 ≥95%, FCC, Kosher, FGAnti-EAAT3 胶质谷运载蛋白3抗体
异戊 98%3,6-壬二烯 97%Anti-EBNA 3A EB病核抗原-3A抗体
注意事项：
1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。
