产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
CAD肉桂醇脱氢酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63805 |
商品介绍:
测定意义
CAD是木质素生物合成途径中的关键酶之一,是木质素单体合成反应中的最后一步,催化多种不同的肉桂醛(香豆醛、芥子醛以及松柏醛等)生成与之相应的肉桂醇。该酶多存在于高等植物、酵母、菌类中,研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理,为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。
测定原理:
CAD催化肉桂醇和NADP生成肉桂醛和NADPH,在340nm下测定NADPH生成速率,即可反映CAD活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品:
小鼠骨形态发生蛋白2(BMP-2)试剂盒 Anti-MRPS27 AntibodyB生长因子
小鼠骨形态发生蛋白4(BMP-4)试剂盒 Anti-MRPS25 Antibody兔血纤蛋白原
小鼠骨形成发生蛋白6(BMP-6)试剂盒 Anti-MRPS34 Antibody大鼠凝聚
小鼠骨形态发生蛋白7(BMP-7)试剂盒Anti-MRPS33 Antibody小鼠抗透明带抗体
小鼠骨性磷(BALP)试剂盒Anti-MRPS35 AntibodyB分化因子
小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)试剂盒Anti-MRPS36 Antibody兔子D二聚体
小鼠脑钠(BNP)试剂盒Anti-MRPS9 Antibody大鼠转化生长因子β激蛋白22
小鼠胸肾表达趋化因子(BRAK)试剂盒Anti-MRPS7 Antibody小鼠粘蛋白/粘液7
小鼠血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)试剂盒Anti-MRPS5 Antibody大豆凝集
小鼠上皮型钙黏蛋白 (E-Cad)试剂盒 Anti-MRPS9 Antibody小鼠嗜性粒阳离子蛋白
小鼠降钙(CT)试剂盒Anti-MRRF Antibody兔子白介1可溶性受体I
小鼠趋化因子C-X-C-基元配体16 (CXCL16) 试剂盒Anti-MSH6 Antibody菜豆凝集
小鼠绒毛膜促性腺(CG)试剂盒Anti-MSC Antibody上皮粘附分子
小鼠促肾上皮质释放(CRH)试剂盒Anti-MRRF Antibody大鼠白介32
小鼠C肽(C-P)试剂盒 Anti-MT-ND5 Antibody兔钩端螺旋体IgG
CAD肉桂醇脱氢酶检测试剂盒微量法小鼠骨保护Anti-OR6C2 Antibody人白共同抗原(LCA/CD45)elisa定量检测试剂盒
人CXC趋化因子受体1Anti-OR6B2 Antibody人丙酮脱氢磷(PDP)elisa定量检测试剂盒
人XC趋化因子受体1Anti-OR5W2 Antibody人过氧化还原1(PRDX1)elisa定量检测试剂盒
小鼠B因子Anti-OR6C3 Antibody人半乳凝集14(GAL14)elisa定量检测试剂盒
大鼠同型半胱Anti-OR6C68 Antibody人肝配蛋白A受体3 (EPHA3)elisa定量检测试剂盒
小鼠抑瘤MAnti-OR6C70 Antibody人丙酮脱氢β(PDHβ)elisa定量检测试剂盒
大鼠糖皮质受体βAnti-OR6C68 Antibody人磷脂A2受体1(PLA2R1)elisa定量检测试剂盒
人二级组织趋化因子Anti-OR6C70 Antibody人胞浆型磷脂A2(cPLA2)elisa定量检测试剂盒