产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
αKGDHα酮戊二酸脱氢酶紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | FS-01S63458 |
商品介绍:
测定意义
α-KGDH(EC 1.2.4.2)广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中,是三羧酸循环调控关键酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶。
测定原理
α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶生成琥珀酰辅酶、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品:
兔周期依赖性激4(CDK4)试剂盒 Anti-CKB Antibody蛋白调解因子7抗体
兔热休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)试剂盒 Anti-Clathrin heavy chain/CLTC Antibody磷化增殖核抗原抗体
兔血管紧张II受体1抗体(ANGⅡR1-Ab)试剂盒 Anti-CKM Antibody磷化腺苷单磷活化蛋白激β1抗体
兔Nesfatin 1蛋白 (NES1)试剂盒 Anti-Claudin 1/CLDN1 Antibody酮脱氢E1β亚单位抗体
兔ras同源物基因家族成员b(RHOB)试剂盒Anti-Claudin 5/CLDN5 Antibody磷化β抗体
兔泛羧基端酯L1(UCHL1)试剂盒Anti-Claudin 3/CLDN3 Antibody胰淀粉抗体
兔白分化抗原CD40配体(CD40L/TNFSF5)试剂盒Anti-Claudin 3/CLDN3 Antibody酮脱氢α1抗体
兔破骨分化因子(ODF)试剂盒 Anti-CLC Antibody磷化酮脱氢α1抗体
兔骨髓前体抑制因子1(MPIF-1/CCL23)试剂盒Anti-CLDN16/Claudin-16 Antibody3磷肌依赖性蛋白激1抗体
兔δ样蛋白1同源物(DLK-1)试剂盒Anti-CLDN2 Antibody磷化3磷肌依赖性蛋白激1抗体
兔XIII A1多肽(F13A1)试剂盒 Anti-CLDN5 Antibodyp53结合蛋白1抗体
兔生长调节致癌基因γ(GROγ)试剂盒 Anti-CLDN5 Antibody磷化蛋白激C亚性D型抗体
兔核孔蛋白133kda(NUP133)试剂盒Anti-CLEC9A Antibody磷化蛋白激C亚性D型抗体
兔游离血红蛋白(f-Hb)试剂盒 Anti-CLK2 Antibody蛋白激C zeta 抗体
兔Apelin 17(AP17)试剂盒 Anti-CLPP Antibody嗜性粒颗粒关键性蛋白抗体
αKGDHα酮戊二酸脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法乙酰乙甲氧乙酯 96%亚硝叔丁酯 90%LP Ab-IgM (Human Legionella antibody IgM) ELISA Kit 人军团菌抗体IgM
间甲 98%3-溴氢盐 97%LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG) ELISA Kit 人军团菌抗体IgG
酵母浸粉 BR3-环戊基酰氯 98%Human paramyxovirus parotitis IgM ELISA Kit 人腮腺炎病IgM
酵母浸膏 BR5-氯戊酰氯 98%Human paramyxovirus parotitis IgG ELISA Kit 人腮腺炎病IgG
3-基氧基硅烷 97%3-氯盐盐 98%EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM) ELISA Kit 人EB病IgM
3-基三乙氧基硅烷 99%1,5-二氟-2,4-二 97%EBv IgA(Human epstein-barr virus IgA) ELISA Kit 人EB病IgA
3-基三乙氧基硅烷 98%内消旋-2,3-二巯基丁二 98%EBv IgG(Human epstein-barr virus IgG) ELISA Kit 人EB病IgG
四氧基硅烷 97%2-氧代-4-基丁乙酯 92%Human Leishimaria antibody ELISA Kit 人利什曼原虫抗体