产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
ICL异柠檬酸裂解酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63483 |
商品介绍:
测定意义
ICL(EC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物种子在萌发过程中,通过乙醛酸循环及其他过程将脂肪转变成碳水化合物。ICL是乙醛酸循环的关键酶之一。
测定原理:
ICL催化异柠檬酸降解为乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD,NADH在340nm下有特征吸收峰,监测340nm吸光度的减小速率可间接反应ICL活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
产品内容:
公司产品仅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品:
小鼠BCL-2相关X蛋白(Bax)试剂盒Human PK(Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit磷化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体
小鼠BCL-2修饰因子(BMF)试剂盒Human PLAA(Phospholipase A2 Activating Protein) ELISA Kit1号染色体开放阅读框167抗体
小鼠BCL-2相关死亡促进因子因子(BAD)试剂盒Human PLB(Phospholipase B) ELISA Kit1号染色体开放阅读框168抗体
小鼠β(BTC)试剂盒Human PK2(Prokineticin 2) ELISA Kit1号染色体开放阅读框170抗体
小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解1(BACE1)试剂盒Human PLCγ1(Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit1号染色体开放阅读框172抗体
小鼠β内啡肽受体(β-EPR)试剂盒 Human PLCγ2(Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit1号染色体开放阅读框173抗体
小鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒Human PKC(Protein Kinase C) ELISA Kit1号染色体开放阅读框174抗体
小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(BID)试剂盒Human PKCβ1(Protein Kinase C Beta 1) ELISA Kit1号染色体开放阅读框177抗体
小鼠白介25(IL-25)试剂盒Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit1号染色体开放阅读框180抗体
小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)试剂盒Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit1号染色体开放阅读框182抗体
小鼠B-趋化因子(BLC)试剂盒Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit1号染色体开放阅读框183抗体
小鼠骨形态发生蛋白1(BMP-1)试剂盒Human PDCD1LG1(Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1) ELISA Kit1号染色体开放阅读框187抗体
小鼠骨形态发生蛋白2(BMP-2)试剂盒 Human PCPE1(Procollagen C Proteinase Enhancer 1) ELISA Kit1号染色体开放阅读框189抗体
小鼠骨形态发生蛋白4(BMP-4)试剂盒 Human PDCN(Podocin) ELISA Kit1号染色体开放阅读框190抗体
小鼠骨形成发生蛋白6(BMP-6)试剂盒 Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit1号染色体开放阅读框192抗体
ICL异柠檬酸裂解酶检测试剂盒微量法乙甲酯 ≥99%(GC)四氢芳樟 98%Anti-EGF 表皮生长因子抗体(大鼠)
乙甲酯 for HPLC, ≥99.5% (GC)四氢香叶 98%Anti-EGFL7 类表皮生长因子域7抗体
乙甲酯 无水级, 99.5%麝香草 ≥99%, FCCAnti-EGFR 表皮生长因子受体抗体
肉桂甲酯 99%10-十一烯 98%Anti-EF1 Alpha 延伸因子EF-1a抗体
肉桂甲酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG桃 98%Anti-EGFRvIII 表皮生长因子受体III型突变体抗体
甲酯 99%10-十一烯 97%Anti-Egr-1 早期生长应答蛋白1抗体
甲酯 ≥99%, FCC10-十一烯 FG,≥90%Anti-eIF2 alpha 真核启动因子2α抗体
癸甲酯 Standard for GC ,≥99.5% (GC) 丁位十一内酯 98%Anti-Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 磷化真核启动因子2α抗体
注意事项:
1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。