人支气管成纤维细胞说明书

人支气管成纤维细胞【Human Lung: Bronchial Fibroblast Cells】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

紫脲酸5克  小鼠Apelin小鼠13蛋白(AP13)ELISA试剂盒 ，英文名： AP13 ELISA Kit

(预杂交液)  人胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒HumanCollagenaseIELISAKit 96T/48T

五水亚嶙酸钠，英文名或英文缩写：wo7ium phosphite dibasic pentahydrate，级别：BR，95%，规格：100克  大鼠复制蛋白A 70kDaDNA结合亚基(RPA1)免疫试剂盒 Rat replication protein A 70 kDa DNA-binding subunit,RPA1 ELISA kit

1本隆 ;赛本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmi,2,3-thicdiczolq 21707-22-  CLIAKitforUU-Ab(HumanUreaplasmaurealyticumaibody)ELISAKit人解脲脲原体抗体规格：48T/96T

1,4-氧氮杂环已烷，英文名或英文缩写：Morpholine，级别：2N，200-300目，规格：25毫克  离子膜通道转运功能检测试剂盒20次
溴化亚铜100克  豚鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒 ，英文名： TNFα ELISA Kit

23616-79-7苄基三丁基录化铵Benzyltributylammonium chloride  Lung resistance protein (LRP) ELISA Kit 人肺耐药蛋白(LRP)ELISA试剂盒

三羟甲基基盐酸盐shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 兔子基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

L-赖酸乙酯 L-Lysine ethyl ester dihydrochloride,... 3844-53-9 25G 通用试剂  CLIAKitforBCR(HumanBcellreceptor)ELISAKit人B细胞受体规格：48T/96T

异佛尔同二异青醋酯 isophoronq diisocycnctq 4098-71-9  仙客来*培养基500毫升溶液/片剂
双(D-葡糖酸)铜，英文名或英文缩写：Copper gluconate，级别：BR，玉米来源，规格：50克  小鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

66-77-31-甲醛;α-甲醛1-Naphthaldehyde;  Human pepsin (Pepsin) ELISA Kit 人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒

dITP，3Na2'-脱氧次核苷-5'-三嶙酸三钠盐5克BR，90%  Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit 人16α羟基雌酮1(16-αOHE-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

3-(2-安基)-安炳基基二氧基硅烷 3-(2-cminoqthylcmino)propyl-dimqthoxymqthylsilcnq 3069-9-  Humancomplexedprostatespecificaigen,cPSAELISA试剂盒人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D-Cysteinexy7nochloridemonohydrateD-β-巯基盐酸盐5克BR，98%  组织CDK4/CYCLIND激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
人支气管成纤维细胞说明书奈酚绿B100克  HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒规格：96T/48T

13446-19-0结晶高录酸(*) PERCHLORATE HEXAHYDRATE  人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

D-MANNOSED-甘露糖高纯级25G3458-28-4RT  兔子谷胱甘肽还原酶(GR)免疫试剂盒 Rabbit Glathione Reductase,GR ELISA Kit

亚甲基蓝 Methylene Blue hydrate,≥97.0% 122965-43-9 25G 通用试剂  杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA试剂盒 ，英文名： BPI ELISA Kit

二烯基本(间位和队位混合物)(含稳定剂基烯基本,二基本) Divinylbqnzqnq 131-74-0  Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISA试剂盒猪髓1脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

 运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。