冷冻保存细胞之方法:
家猫肾细胞;CATK1说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品描述:
细胞名称 家猫肾细胞;CATK1说明书
形态特性上皮样,多角
生长特性贴壁生长
特征特性该细胞来源于一雄性家猫的肾组织。2000年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
传代方法1:2传代;3-4天一次
传代情况P4
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测荧光法(-)
STR-
同工酶
染色体
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)家猫肾细胞;CATK1说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项:
1.一般客户拿到家猫肾细胞;CATK1说明书后,应该注意什么?
客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
(4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(6)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(7)视具体情况而定。
KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株;G422
IL13 Others Mouse 小鼠 IL13 / ALRH 人细胞裂解液 (阳性对照)
人脐带单核细胞*培养基 100mL
7WCY1.0细胞,人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株 非01群霍乱弧菌 豹猫肺成纤维样细胞;LCL4
CCL1 Protein Human 重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白
NR8383(大鼠肺泡巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人细胞裂解液 (阳性对照)
家猫肾细胞;CATK1说明书鲑鱼降钙素(SCT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试剂盒 Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit
人抗凝血酶受体(A)ELISA试剂盒 ,英文名: A ELISA Kit
Ratheatshockprotein,HSP47ELISA试剂盒大鼠热休克蛋白47(HSP47)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanFetuinA,FETU-AELISA试剂盒人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-jELISAKit人免疫球蛋白j链(Ig-j)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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