细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)大鼠脑胶质瘤细胞;C6价格准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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产品描述:
细胞名称 大鼠脑胶质瘤细胞;C6价格
形态特性成纤维细胞样
生长特性贴壁生长
特征特性C6是由Benda等用N-亚硝基甲脲诱导的大鼠胶质瘤克隆,并经过一系列的体外培养和动物传代交替后建成的。该细胞表达S-100;产生生长激素;糖皮质激素作用下可以产生磷酸甘油脱氢酶。当细胞从低密度生长至回合状态时,S-100产量增加10倍。
培养条件F10:Ham'sF10NutrientMixture2.5%FBS+15%HS
传代方法1:2~1:3传代;2~3天换液1次。
传代情况P50
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测培养法(-)
STR-
同工酶
染色体
注意事项:
1.一般客户拿到大鼠脑胶质瘤细胞;C6价格后,应该注意什么?
客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
(4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(6)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(7)视具体情况而定。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-01
CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人细胞裂解液 (阳性对照)
人卵巢上皮细胞*培养基 100mL
SP2/0-Ag14细胞,鼠骨髓瘤细胞 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纤维细胞) 人羊膜细胞;WISH
CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 标签)
RM-1(小鼠前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠脑胶质瘤细胞;C6价格鸡传染性贫血病毒(CIAV)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人异质性胞核核糖核蛋白A1(hNP A1)免疫试剂盒 Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hNP A1 ELISA Kit
可溶性CD163分子(sCD163)ELISA试剂盒 ,英文名: sCD163 ELISA Kit
RatEotaxin1ELISA试剂盒大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanDopamineD1receptor,D1RELISA试剂盒人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit人热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA试剂盒规格:96T/48T
冷冻保存细胞之方法:
大鼠脑胶质瘤细胞;C6价格冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。