注意事项;
1. 小鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书一般客户拿到细胞后,应该注意什么?
客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
以下是小鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书的订购信息;
小鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书 【Mouse Lung PrimacellTM:Normal Alveolar Epithelial Cells】
肺泡上皮细胞由肺泡I型和Ⅱ型上皮细胞组成,线性分布于肺内99%以上的表面积。肺泡I型细胞是一种大而扁平细胞,其稀薄的细胞质延展占据了其内表面积的95%以上。它含有水通道,是所有哺乳动物细胞中水渗透性的细胞。肺泡Ⅱ型上皮细胞只占据了2-5%的面积,它能产生,分泌并再利用肺表面活性物质。肺泡Ⅱ型上皮细胞同时含有Na+-K+-ATP酶和阿米洛利敏感的上皮细胞Na+通道。 虽然肺组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的肺组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的肺组织片能使得肺组织中成肺细胞的一些功能特性发生改变,从而将成肺细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成肺细胞。本体系提供了的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以地降低所培养的成肺原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠肺泡上皮细胞细胞培养试剂盒适合于培养人的成肺组织细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM小鼠肺泡上皮细胞细胞组织解离液(3×1ml) (2)小鼠肺泡上皮细胞细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM小鼠肺泡上皮细胞细胞成纤维抑制剂(1ml(500x)) (4)小鼠肺泡上皮细胞组织洗液(5x100 ml) (5)小鼠肺泡上皮细胞细胞生长因子(1ml 500x)及血清(5x10ml) (6)小鼠肺泡上皮细胞细胞基础培养基(5 x100ml) (7)小鼠肺泡上皮细胞组织预备液(1 x100 ml) (8)小鼠肺泡上皮细胞细胞培养试剂盒使用说明书
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司科技提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、公司售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
细胞培养的优点
1小鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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羌活Rhizoma et Radix Notopterygii Notopterol 羌活醇 88206-46-6 C21H22O5 ≥98%
毛两面针速MconitidinqqlqmqntHPLC≥98%,20mg/支
夹竹桃科(Apocynaceae) 红鸡蛋花 Plumeria rubra L.全植物 Taraxasteryl acetate 蒲公英甾醇乙酸酯 6426-43-3 C32H52O2 安力农(100 79
中药对照药材柘木121237-200502TLC法鉴别
Isochlorogenic acid A(3',5')异绿原酸A纯度:≥96%
亚麻木酚素 Secoisolariciresinol Diglucoside (≥9... 148244-82-0 20MG 标准品
紫茎泽兰Eupatorium adenophorum 8-轻基-4-荜澄茄烯-3-同 97372-53-7 C15H24O2 ≥97% 丙咪嗪:用于系统适用性试验(Y000089
对照品*100506-200301含量测定用
Enflurane恩扶烷标准品13838-16-91ml恩扶烷标准品
两面针Zanthoxylum nitidum Cuspidiol 4-[[(2E)-4-羟基-3-甲基-2-丁烯基]氧基]本丙醇 51593-96-5 C14H20O3 ≥95%
臭常山Orixa japonica Thunberginol C 3,4-二氢-6,8-二羟基-3-(4-羟基本基)-1H-2-本并-1-酮 147517-06-4 C15H12O5 ≥97%
盐醋葫芦巴减igonqllinqxy7nochloridq6138-41-620mg
芒柄花苷;刺芒柄花苷,刺芒柄花素-7-葡萄糖苷 Ononin 486-62-4 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
对照品盐酸左氧扶沙星130537-200301仅供红外鉴别
1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose 14937-32-7 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
肉汤培养基250g用于测量磷细菌肥料中磷细菌的总数
赖氨酸铁琼脂 检测微生物,依据对赖氨酸的代谢(脱羧、脱氨基、产生) 500g incubation media 赖氨酸铁琼脂 检测微生物,依据对赖氨酸的代谢(脱羧、脱氨基、产生) 500g
白色链霉菌 支/瓶
无菌均质袋
DoubleLactoseBileMedium肉浸液肉汤2408g用于*、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准)
中国蓝乳糖琼脂 (CM0209) Oxoid incubation media 中国蓝乳糖琼脂 (CM0209) Oxoid
溶壁微球菌 产抗生菌素 支/瓶
平板计数琼脂(含麦芽提取物)250g用于菌落总数测定。
*盐琼脂(USP) 250g 用于*选择性分离培养
小鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书绿脓菌素测定用培养基(PDP)27050250g用于鉴别绿脓杆菌产生绿脓菌素试验(GB-2002,(化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。
C.L.E.D. 培养基 (带Andrades 指示剂) (CM0423) Oxoid incubation media C.L.E.D. 培养基 (带Andrades 指示剂) (CM0423) Oxoid
噬糖盐红菌 食用 支/瓶
MethylRedIndicatorBox
培养基R 250g 用于大肠菌群选择性增菌
细胞培养操作规程;
一.小鼠肺泡上皮细胞培养试剂盒说明书培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。