2025年07月11日 11:18西安齐岳生物科技有限公司点击量：5
AF647-WGA，AF647小麦胚芽凝集素的合成步骤
AF647-WGA 是通过将Alexa Fluor 647 NHS ester与WGA蛋白共价偶联获得的荧光探针，能够高效识别细胞膜表面的糖类结构，尤其适合活细胞膜的非侵入式染色。
合成步骤如下：
缓冲液准备：将WGA溶解于pH 8.0的0.1 M NaHCO₃缓冲液中，确保蛋白中赖氨酸残基呈去质子化状态，增强亲核性。
染料溶液制备：将AF647 NHS ester溶解于无水DMSO中，确保反应体系中NHS酯不被水解。
偶联反应：按摩尔比1:3（WGA:dye）缓慢将染料滴加至蛋白溶液中，室温避光反应30分钟至1小时。
终止反应：加入或Tris缓冲液终止未反应的NHS酯，并防止蛋白交联。
纯化步骤：使用Sephadex G-25凝胶柱层析或透析法去除游离染料，保留纯净的AF647-WGA。
分析检测：采用UV-Vis光谱法测定蛋白和染料的吸收峰，计算标记度（dye/protein ratio）并评估标记效率。
产品名称：AF647-WGA，AF647小麦胚芽凝集素
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研
状态：固体/粉末/溶液
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仅用于科研，不能用于人体。小编axc
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