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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
00143 人*脱氢酶(GDH/GLDH)ELISA试剂盒 Human Glutamate dehydrogenase;GDH/GLDH ELISA Kit 96T/48T
00144 人胆酸(CA)ELISA试剂盒 Human Cholic acid,CA ELISA Kit 96T/48T
00145 人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒 Human Helicobacter pylori IgG ,Hp-IgG ELISA Kit 96T/48T
00146 人γ谷氨酰转移酶(GGT) ELISA试剂盒 Human gamma glutamyl transpeptidase,GGT ELISA Kit 96T/48T
00147 人胃粘液素(GM)ELISA试剂盒 Human Gastric Mucin,GM ELISA Kit 96T/48T
00148 人Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒 Human cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit 96T/48T
00149 人幽门螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)ELISA试剂盒 Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISA Kit 96T/48T
00150 人胃抑素(GIP)ELISA试剂盒 Human gastric inhibitory polypeptide,GIP ELISA Kit 96T/48T
00151 人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒 Human Collagen-like Bioprotein Ⅱ,HCBⅡ ELISA Kit 96T/48T
00152 人多肽YY(Peptide-YY)ELISA试剂盒 Human Peptide YY ELISA Kit 96T/48T
00153 人促胃液素受体(GsaR)ELISA试剂盒 Human gastrin receptor,GsaR ELISA Kit 96T/48T
00154 人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒 Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit 96T/48T
00155 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒 Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit 96T/48T
00156 人丙二醛(MDA)ELISA试剂盒 Human malondialchehyche,MDA ELISA Kit 96T/48T
00157 人胆囊收缩素/肠促*肽(CCK)ELISA试剂盒 Human cholecystokinin,CCK ELISA Kit 96T/48T
00158 人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit 96T/48T
00159 人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒 Human Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
00160 人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒 Human Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
00161 人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 Human procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit 96T/48T
00162 人透明质酸(HA)ELISA试剂盒 Human Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
00163 人Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA试剂盒 Human Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit 96T/48T
00164 人Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒 Human Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
00165 人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒 Human Laminin,LN ELISA Kit 96T/48T
00166 人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 Human Fibronectin,FN ELISA Kit 96T/48T
00167 人卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒 Human ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit 96T/48T
00168 人粒细胞特异性抗核抗体(GS-ANA)ELISA试剂盒 Human granulocyte specific antinuclear antibody,GS-ANA ELISA Kit 96T/48T
00169 人封闭抗体(BA)ELISA试剂盒 Human Blocking antibody,BA ELISA Kit 96T/48T
00170 人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒 Human ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit 96T/48T
00171 人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒 Human anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISA Kit 96T/48T
00172 人抗载脂蛋白抗体A1(Apo A1)ELISA试剂盒 Human anti-apolipoprotein A1 antibody,Apo A1 ELISA Kit 96T/48T
00173 人抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA试剂盒 Human anti-insulin receptor antibody,AIRA ELISA Kit 96T/48T
00174 人抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒 Human anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA Kit 96T/48T
00175 人抗白蛋白抗体(AAA)ELISA试剂盒 Human anti-albumin antibody,AAA ELISA Kit 96T/48T
00176 人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)ELISA试剂盒 Human anti-cyclic citrullinated peptide,CCP ELISA Kit 96T/48T
00177 人抗核周因子抗体(APF)ELISA试剂盒 Human anti-perinuclear factor,APF ELISA Kit 96T/48T
00178 人抗肌动蛋白抗体(AAA)ELISA试剂盒 Human anti-Actin antibody,AAA ELISA Kit 96T/48T
00179 人抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体(HIT)ELISA试剂盒 Human heparin associated antibody,HIT ELISA Kit 96T/48T
00180 人抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒 Human anti-glycoprotein antibody,GP ELISA Kit 96T/48T
00181 人抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒 Human anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit 96T/48T
00182 人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒 Human oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit 96T/48T
00183 人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒 Human Chlamydia trachomatis,CT ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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