左右不对称发育因子2ELISA试剂盒的制作方法和技术原理

左右不对称发育因子2(LEFTY2)ELISA试剂盒   技术原理： (1).抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。 (2).结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。 (3).酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。 (4).受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。 (5).此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。 (6).加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
 

左右不对称发育因子2(LEFTY2)ELISA试剂盒  elisa试剂盒制作方法：
1、取经过稳定的血液，作离心分离15～30分钟，每分钟转速为2500～3000转，从而取得固形物，去除血浆，用水使固形物沉渣溶解。
2、置血红素于培养基中，为了使培养基酸化而使血红素分子中的二价铁血红素和血球蛋白的结合体分离，预先制备好醋酸和氯化钠的混合物并将它加热到90～110℃。
3、混合时将固形物的溶血产物缓慢地添加到加热的混合物中，重新把温度逐渐地升高到沸点，煮沸5～15分钟，以便使结合体*分离，接着将混合物逐步冷却到室温。
4、为了使二价铁血红素溶解并消除，在混合物中按溶物产物比值2∶1～5∶1添加*醚，这时提取出来的蛋白质呈白棉絮状，将溶液过滤，再用*醚清洗。
5、100毫升血中提取的蛋白质产品相当于14.4克，应用这种方法，每100毫升的血液可提高蛋白质得率45%。
处理办法：
A、使用吹风机，将吹风机打开，并调节到zui高温度，对96孔板吹1-2秒就可以了。
B、采用更好材质的板、或采用专门的96孔板振荡器。
C、可以用tip吸走，但实验中费事、效果还不是很理想。
D、使用注射器针头扎破。