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人前列腺素E2(PGE2)ELISA检测试剂盒试剂盒检测方法和操作流程

时间:2018-11-29阅读:781
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人前列腺素E2(PGE2)ELISA检测试剂盒试剂盒检测方法

 ① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干 
    ② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干 
    ③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干 
    ④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液 
    ⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。

人前列腺素E2(PGE2)ELISA检测试剂盒操作流程

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值

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