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进口ELISA试剂盒代测常见问题分析

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进口ELISA试剂盒代测常见问题分析
1.如何测定引物的OD值? 
用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量,请注意紫外分光光度计的使用,测定时溶液的吸光度稀释到0.2-0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,取部分溶液稀释到1ml并在1ml标准比色皿中测定其吸光度,即为所测体积的OD值,进而可以计算出母液的OD值。 
举例:您拿到一管干粉的DNA,用1ml水溶解成母液,取该母液50μL稀释成1ml并在1ml标准比色杯中测定的吸光度为0.25,说明该50μL中含有0.25OD的DNA,也即说明原来1ml母液中含有5OD的DNA。 
2.怎样溶解引物? 
我们的的合成报告单给出了每OD引物稀释为100μmoL/L(即100pmol/ul)浓度的加水量,您可以根椐您的实验需要加入适量的无核酸酶的双蒸水(PH>6.0)或TE缓冲液(PH 7.5-8.0),开启瓶盖溶解之前在3000-4000转/分钟 的转速下离心1分钟,防止开盖时引物散失。 
3.合成的引物应如何保存?
没有溶解的引物非常稳定,可以在-20℃下保存至少1年,溶解好的引物可以事先稀释为100μmoL/L的储存液,分装数份保存于-20℃冰箱,可以保存至少半年以上(反复多次冻融会降低使用寿命)。使用前,将浓溶液稀释成工作液(10 pmol/ml或20 pmol/ml)后进行实验。 
4.如何检测引物的纯度? 
实验室方便的作法是用PAGE方法。使用加有7M尿素的一定浓度的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳,<12个碱基的引物用20%的胶,12-60个碱基的引物用16%的胶,>60个碱基的引物用12%的胶,取0.2OD左右的引物,用尿素饱和液溶解或引物溶液中加入尿素干粉直到饱和,上样前加热变性(95oC,2mins)。加入尿素的目的一是变性,二是增加样品比重,容易加样。600V电压进行电泳,一定时间后(约2-3小时),剥胶,用荧光TLC板在紫外灯下检测带型,在主带之下没有杂带,说明纯度是好的(有时由于变性不充分,主带之上可能会有条带,乃是引物二级结构条带)。 
5.一般的合成的引物在5"和3"末端有磷酸基团吗?
没有,5"和3"末端均为-OH基。如需要加磷酸基团,订货时请特别注明,此时需收取磷酸化的费用。 
进口ELISA试剂盒代测小鼠氨基端前心钠肽(NT-ProANP)ELISA试剂盒    ,英文名:    NT-ProANP ELISA Kit    
小鼠氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)ELISA试剂盒    ,英文名:    NT-ProBNP ELISA Kit    
小鼠阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒    ,英文名:    POMC ELISA Kit    
小鼠δ样蛋白1同源物(δLK1)ELISA试剂盒    ,英文名:    δLK1 ELISA Kit    
小鼠γ-内啡肽(γEP)ELISA试剂盒    ,英文名:    γEP ELISA Kit    
小鼠γ-谷氨酰转移酶1(γGT1)ELISA试剂盒    ,英文名:    γGT1 ELISA Kit    
小鼠γ-氨基丁酸A受体α2(γABRα2)ELISA试剂盒    ,英文名:    γABRα2 ELISA Kit    
小鼠γ-氨基丁酸(γABA)ELISA试剂盒    ,英文名:    γABA ELISA Kit    
小鼠β-血小板球蛋白(βTG)ELISA试剂盒    ,英文名:    βTG ELISA Kit    
小鼠β细胞素(βTC)ELISA试剂盒    ,英文名:    βTC ELISA Kit    
小鼠β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1(βACE1)ELISA试剂盒    ,英文名:    βACE1 ELISA Kit    
小鼠β-内啡肽(βEP)ELISA试剂盒    ,英文名:    βEP ELISA Kit    
小鼠β-骨胶原交联(βCTx)ELISA试剂盒    ,英文名:    βCTx ELISA Kit    
小鼠β2-微球蛋白(β2M)ELISA试剂盒    ,英文名:    β2M ELISA Kit    
小鼠α-生育酚转运蛋白(TTPα)ELISA试剂盒    ,英文名:    TTPα ELISA Kit    
小鼠α-乳清蛋白(αLA)ELISA试剂盒    ,英文名:    αLA ELISA Kit    
小鼠α-内啡肽(αEP)ELISA试剂盒    ,英文名:    αEP ELISA Kit    
小鼠α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒    ,英文名:    αCTx ELISA Kit    
小鼠α-胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒    ,英文名:    SPTAN1 ELISA Kit    
小鼠α白蛋白(AFM)ELISA试剂盒    ,英文名:    AFM ELISA Kit    
小鼠α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒    ,英文名:    α2PI ELISA Kit    
小鼠α2-巨球蛋白(α2M)ELISA试剂盒    ,英文名:    α2M ELISA Kit    
小鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒    ,英文名:    αHSG ELISA Kit    
小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA试剂盒    ,英文名:    α1M ELISA Kit    
小鼠α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA试剂盒    ,英文名:    α1AGP ELISA Kit    
小鼠α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA试剂盒    ,英文名:    α1AT ELISA Kit    
小鼠Zeste同源物增强子1(EZH1)ELISA试剂盒    ,英文名:    EZH1 ELISA Kit    
小鼠YY肽(PYY)ELISA试剂盒    ,英文名:    PYY ELISA Kit 进口ELISA试剂盒代测   

 

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